目的:在一定条件下,经兔股动脉灌注入冷冻保护剂二甲基亚砜,通过微透析技术检测其在断肢不同部位的渗透质量摩尔浓度,计算得出该条件下冷冻保护剂是否在目标部位达到有效保护浓度,为冷冻肢体再植有效使用冷冻保护剂提供理论基础。方法:在室温(20-24℃)、恒温38℃、微透析加样泵流速2.2μL/min的条件下,进行微透析体内、外校正实验,得出动物实验相对回收率。取健康新西兰大白兔15只,手术部位提前一天备皮,10%水合氯醛经耳缘静脉注射麻醉,麻醉成功后,缝合固定大腿近端皮肤与肌肉组织,缝合平面近端离断大腿肌肉,保护股动、静脉,结扎小隐静脉,向上贴骨剥离股骨与附着肌肉至髋关节,打开髋关节囊,离断髋关节。静脉留置针分别置入股动、静脉,2-0缝合线捆扎固定,在兔生理温度、压力条件下,肝素盐水(1.25w IU/500ml NS)经股动脉灌注,至股静脉回流液体清亮。微透析线性探针分别置入小腿前外侧皮下组织和小腿后肌群,探针平衡15mins后,依照灌注液体不同分为10%组、20%组和NS组,分别灌注10%、20%二甲基亚砜冷冻保护剂和生理盐水,持续40mins,微透析探针每15mins收集一组,股静脉回流液组分别在冷冻保护剂灌注后1、3、5、10、20、30、40、50mins手工收集。不同浓度组可得到皮下组、肌肉组和静脉回流组三组样品,结果经冰点渗透压仪检测并处理后,进行统计学分析。结果:10%组皮下和肌肉组织的微透析回收液检测值各样品间无明显变化,为298.5±1.12m Osm/kg H2O和302.5±1.98m Osm/kg H2O,与对照组比较无统计学差异,而静脉回流液中检测到Me2SO浓度最高为5.746%v/v,其后进入平台期;20%组的皮下组织和肌肉的微透析回收液中分别得到Me2SO浓度最高为8.932%v/v和9.996%v/v;静脉回流液中检测到Me2SO浓度最高为18.360%v/v,三组数据在达到高峰后均进入平台期。结论:在室温(20-24℃)、断肢温度38℃、微透析加样泵流速2.2μL/min的条件下,CMA30线性MD探针应用在兔离断后肢可行,其相对回收率为14.07%。在兔生理温度、压力下,冷冻保护剂二甲基亚砜通过离断兔后肢股动脉进行灌注,10%组不能在局部达到有效二甲基亚砜浓度,20%组30mins之内肌肉、血管的二甲基亚砜可以达到有效浓度,皮下组织的接近有效浓度。