利用生物技术防治甘蔗糖厂“蔗饭”问题的基础研究(一)

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为了利用生物法解决甘蔗糖厂葡聚糖问题,本论文研究:1、葡聚糖产生菌的分离和鉴定:结果为肠膜明串珠菌,是一种产生葡聚糖影响甘蔗糖厂生产蔗糖的细菌。 2、发酵产物葡聚糖化学组成的鉴定和产生条件的研究:葡聚糖是明串珠菌发酵蔗糖生成的有高粘性的物质,俗称“蔗饭”,是一种由完全甲基化的无水吡喃葡萄糖单体构成的化合物,糖苷键的95%是α-(1,6)键型,其余为α-(1,3)和其他键型,分子量达几百万以上:经初步研究适合葡聚糖产生的摇瓶发酵条件为:蔗糖10%、酵母膏0.4%、磷酸氢二铵0.6%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.1%,无机离子;发酵条件为:装量50ml(250ml)、接种量10%、pH值为7.0、温度25℃、转速100rpm、时间26h。3、筛选、诱变能产生分解葡聚糖的酶的优良菌株并进行简单鉴定:经UV、CO60、LiCI诱变后得到了葡聚糖酶高产菌株SB126,经检测其酶活达到70U/ml。诱变过程为:出发菌株DA12——(Co60)DA12(2)——(UV)UD(7)——(LiCI)SB126。并鉴定为枯草芽孢杆菌属。4、进行葡聚糖酶摇瓶发酵条件的优化并提取发酵产物进行有关葡聚糖酶性质的研究;适宜发酵培养基为:葡萄糖4%、磷酸氢二铵0.03%、磷酸二氢钾0.15%、硫酸镁0.1%;发酵条件为:装量30ml(250ml)、转速180rpm、pH值7.0、温度30℃、接种量8%、发酵时间4d。并对酶的有关性质进行研究,比较适宜的酶解温度50℃,在pH值低于5.0时较稳定,酶的热稳定性在40℃以下。铜、锰、镁和亚铁离子有抑制作用,而锌、钙、钴和铁离子有激活作用。
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