论文部分内容阅读
宫颈癌是一种严重危害妇女健康和生命的生殖系统恶性肿瘤,目前病因尚未完全明了,可能是社会经济因素、宫颈病变、病毒感染及免疫功能下降等综合作用的结果。由于发病机理多种多样,防治很难一蹴而就。目前治疗宫颈癌大多采用化学合成药物,如:顺铂、5—氟尿嘧啶、异环磷酰胺等,在治疗过程中易产生毒副作用和多药耐药性。大多数天然药物以其毒副作用低和不产生耐药性引起研究者的高度关注。因此,筛选天然来源的治疗宫颈癌及其他癌症的药物前体成为药理学领域的研究热点。大果雪胆变种（Hemsleya macrocarpa var.clavata）是多年生植物,主要分布于中国的西南部,特别是云南和四川两省。此类植物作为一种中草药,民间广泛用于治疗支气管炎、杆菌型痢疾、肺结核、胃溃疡等疾病,云南少数民族也作为治疗恶疮、皮下硬肿等肿瘤的治疗。雪胆素亚胺A（Hemsleyin imine A）是首次从大果雪胆变种中分离得到的一个新的鞘脂类亚胺化合物。本研究通过建立Hela细胞体外筛选模型,对雪胆素亚胺A的抗宫颈癌活性及其作用机理进行了研究,结果如下:1.不同终浓度（320μg/mL、160μg/mL、80μg/mL、40μg/mL、20μg/mL、10μg/mL、5μg/mL）的雪胆素亚胺A作用的Hela细胞,在不同时间点（12hr、24hr、48hr、72hr）均表现出不同程度的增殖抑制作用。光镜观察可见细胞变圆、皱缩、细胞膜破裂、细胞漂浮、出现大小不一的细胞碎片,且这些征象随作用时间及浓度的增加呈现递增的趋势。结果提示,雪胆素亚胺A对Hela细胞有抑制增殖和诱导Hela细胞凋亡的作用。2.MTT实验结果显示,雪胆素亚胺A对人宫颈癌细胞Hela的增殖有明显的抑制作用,并且随着作用浓度的增加和时间的延长这种抑制作用而加大,即呈明显的时间和浓度依赖性。48hr和72hr的半数细胞抑制浓度（IC50）分别为56.94μg/mL、23.98μg/mL。3.Annexin V-FITC/PI双染标记法检测到,终浓度160μg/mL雪胆素亚胺A作用Hela细胞24hr、48hr和72hr后均有早期凋亡改变,凋亡细胞百分率分别为4.76%和18.6%和32.1%,与其对照组比较有显著性差异（p＜0.01）;此外,雪胆素亚胺A对Hela细胞周期也有影响,使G1/G0期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少,细胞增殖指数降低。这些结果表明,雪胆素亚胺A使癌细胞增殖受阻于G1→S期,并诱导了凋亡。综上所述,雪胆素亚胺A对体外培养的人宫颈癌细胞系Hela有明显的抑制增殖和诱导细胞凋亡作用。这些结果表明雪胆素亚胺A可能是一种治疗宫颈癌及其他癌症的先导化合物,当然这还需要大量的体内、体外实验进行研究。