论文部分内容阅读
本研究通过基因工程方法构建高表达MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白的酵母工程菌株,并优化发酵、纯化条件。以MTT法和集落形成实验检测MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白在体外的促造血增殖活性;以transwell体系检测融合蛋白对免疫造血细胞的趋化活性,进行了动物体内实验,研究MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白对放疗引起的造血损伤的修复作用和对荷瘤小鼠的抗肿瘤效应,并研究了其相关的作用机制。本课题分为两部分:在第一部分研究中,我们通过基因工程方法构建筛选了高表达MIP-2γ/hGM-CSF、MIP-2γ/mGM-CSF融合蛋白的酵母工程菌株,并通过优化发酵、纯化技术,制备了两种融合蛋白。在第二部分研究中,我们首先证实了MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白在体外能够显著促进造血细胞增殖,有效趋化免疫活性细胞,并研究了其作用机制。在此基础上进行动物体内实验,显示MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白对放疗造成的造血损伤具有良好的治疗作用,同时具有一定的抗肿瘤效应。我们还首次发现MIP-2γ具有抑制血管生成的新功能,MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白有可能成为我国具有自主知识产权的新型细胞因子产品,具有良好的科研价值和临床应用前景。