抗黑条矮缩病水稻的筛选和分子检测

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水稻(Oryza sativa L.)是我国重要的粮食作物之一,在国民经济中占有举足轻重的作用。近年来,由水稻黑条矮缩病毒(Rice black streaked dwarf virus,RBSDV)引起的黑条矮缩病(Rice black streaked dwarf disease,RBSDD)是我国南方粳稻区为害最严重的病毒病害,对水稻生产造成了重大的威胁。由于天然抗性基因的缺乏,促使我们在致力于对目前生产上主要推广品种进行抗性评价的同时,也将目光投向转基因抗RBSDV水稻新种质的创制。基于RNA干涉(RNA interference,RNAi)原理的转基因手段是近年来获得抗病植物的有效手段之一。相比传统育种手段,转基因新材料的创制具有周期短、农艺性状可控等优点。在水稻黑条矮缩病的重发区河南开封,通过自然接种法,对66个生产上主要推广品种和育种高代进行了抗病评价,发病率从13.01%到93.7%不等。其中连稻9805发病率最低,为13.0%;盐1403发病率最高,为93.7%;感病对照淮稻5号为89.5%。研究结果表明:仅连稻9805一个品种表现为高抗,两优1129、Y两优3399、宁粳4号、大粮207、徐稻7号、扬两优6号、X008、中稻1号、超级稻、圣稻15、原旱稻3号和圣稻301等12个品种表现为中抗,可推广田间种植或用作抗性基因的研究。本研究在水稻黑条矮缩病的常发区和重发区,对T4代转基因水稻的14个株系和T5代转基因水稻的8个株系进行田间抗病筛选,并通过分子手段进行鉴定,筛选到不含有潮霉素选择标记基因的阳性株系8个。其中高抗株系一个(RB201),中抗株系两个(RB101和RB110),RB85、RB104、RB134、RB143和RB200等5个株系则表现不同程度的感病。
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