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目的:观察人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)/兔的平滑肌细胞(smooth muscle cells,SMCs)共培养模型中不同浓度的纤维蛋白原(Fg)及其降解产物(Fb和FDPs)对HUVECs移行及对黏附分子-1(Intercellularadhesion molecule-1,ICAM-1)表达的影响并探讨其可能的影响机制。方法:1.以Transwell膜为载体,建立原代培养的HUVECs并与兔SMCs形成共培养体系,对两种细胞的生长特性进行观察;2.应用不同浓度的(0mg/ml、0.5 mg/ml、1.5 mg/ml、3.0mg/ml、4.5mg/ml和6.0mg/ml)Fg、Fb和FDPs干预共培养体系,观察HUVECs趋化(通过Transwell膜装置)和迁移(通过细胞刮伤模型)现象;3.应用0mg/ml、0.5 mg/ml、3.0mg/ml和6.0mg/ml Fg、Fb和FDPs,以及在上述亚组中加用I-κB拮抗剂BAY11-7082(浓度为20μM)或PKC拮抗剂Staurosporine(浓度为50nM)分别对共培养细胞模型进行干预,干预后分别从基因转录水平(Reverse transcription polymerase chainreaction,RT-PCR法)和蛋白表达(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA法)水平检测该模型中HUVECs ICAM-1表达情况。结果:1.原代培养的HUVECsⅧ因子抗体免疫组化染色呈阳性。在共培养下HUVECs和SMCs在Transwell膜上生长良好,HUVECs单层生长,呈“铺路石”样外观:SMCs多层生长,呈明显的“峰-谷”状外观。膜两侧的HUVECs和SMCs可以发生细胞连接。2.Fg组:中高浓度(≥3.0mg/ml)Fg呈浓度依赖性的促进HUVECs的迁移和趋化,并能明显上调ICAM-1的转录和蛋白表达,两种拮抗剂均抑制了ICAM-1的转录和蛋白表达,其中BAY11-7082在3.0mg/ml、6.0mg/ml抑制明显,Staurosporine仅在3.0mg/ml时抑制效果明显。Fb组:≥1.5mg/ml的Fb时呈浓度依赖性的使HUVECs的趋化和迁移数增加(P＜0.05),在高浓度(6.0mg/ml)时促HUVECs ICAM-1mRNA水平和蛋白表达增加,两种拮抗剂均可下调高浓度(6.0mg/ml)Fb的促ICAM-1表达作用。FDPs组:FDPs≥0.5mg/ml时HUVECs的趋化迁移数明显增加(P＜0.05),FDPs在高浓度(6.0mg/ml)时明显促进HUVECs ICAM-1在转录和蛋白水平的表达,两种拮抗剂均可下调高浓度(6.0mg/ml)FDPs的促ICAM-1表达作用。结论:1:成功培养出原代人HUVECs,利用Transwell膜成功建立了HUVECs/SMCs共培养体系,该模型能较好的模拟血管壁的结构关系,为进一步顺利开展相关研究奠定了细胞模型的基础。2:中高浓度的纤维蛋白(原)及其降解产物可以促进HUVECs移行(趋化与迁移)过程,在动脉粥样硬化的发生发展中起重要作用。3:纤维蛋白(原)及其降解产物通过影响HUVECs细胞ICAM-1的表达参与了动脉粥样硬化炎症黏附过程,其中PKC和NF-κB通路可能参与了这一黏附过程的调控。