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方法：设计并化学合成4对特异性沉默lncRNAuc001kfo的siRNA(分别编为1、2、3、4号)和带FAM荧光的错义siRNA (NC-FAM-siRNA)。(1)转染效率检测,采用不同浓度梯度的转染试剂Lipofectamine2000和siRNA-mate(转染试剂的剂量分别为0.125μl,0.25μl和0.51μl)以及NC-FAM-siRNA5pmol,转染肺腺癌A549细胞,在倒置荧光显微镜下检测转染效率,确定转染条件。(2)干扰效率检测,通过荧光实时定量PCR技术分别检测4对siRNA针对lncRNA uc001kfo的干扰效率。结果：(1)用0.5μl lipo2000试剂转染5pmol NC-FAM-siRNA时,细胞状态可,转染效率约70%；(2)4对siRNA中,1号siRNA能有效干扰lncRNAuc001kfo,干扰效率在48h和72h均超过70%,明显高于其它3对siRNA.结论：1号siRNA能有效抑制lncRNAuc001kfo的表达。第三部分抑制长链非编码RNA uc001kfo的表达对肺腺癌A549细胞影响的体外研究目的：探讨lncRNA uc001kfo的表达与肺腺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭能力的相关性。方法：用前期实验筛选出的针对lncRNA uc001kfo特异性的siRNA (siRNA-uc001kfo)和错义siRNA (NC-FAM-siRNA)转染肺腺癌A549细胞,并进入如下分组：Mock组(未加干预的空白对照组),NC对照组(转染5pmol错义NC-FAM-siRNA对照组),实验组(转染5pmol uc001kfo-siRNA)。(1)行CCK-8细胞增殖实验,检测抑制IncRNA uc001kfo的表达后24h、48h、72h和96h细胞增殖情况的变化；(2)行Transwell迁移实验,观察抑制lncRNA uc001kfo表达24h后A549细胞迁移能力的改变；(3)行Transwell侵袭实验,观察抑制lncRNA uc001kfo表达24h后A549细胞侵袭能力的改变。结果：(1)CCK-8实验显示,在转染后24h,48h,72h,96h等不同时间点M组OD450nm值分别为(0.273±0.018),(0.403±0.027),(0.537±0.011),(0.724±0.017),NC对照组分别为(0.250±0.005),(0.368±0.024),(0.512±0.042),(0.708±0.031),实验组分别为(0.260±0.009),(0..374±0.020),(0.506±0.030),(0.684±0.047)与对照组相比,siRNA-uc001kfo处理后的A549细胞从第一天到第四天的细胞增殖能力无明显统计学差异；(2)在Transwell迁移实验中,M组、NC组、实验组每个视野细胞数分别为(172.3±10.4),(163.8±13.2)和(84.4±11.8)个,实验组A549细胞穿过基底膜的数量与NC对照组相比,明显降低,p<0.05;(3)在Transwell侵袭实验中,M组、NC组、实验组每个视野细胞数分别为(118±11.4),(104.8±15.4)和(59.2±10.7)个,实验组A549细胞穿过ECM胶的数量与NC对照组相比,明显降低,p<0.05。结论：lncRNA uc001kfo参与了A549细胞迁移与侵袭能力的调控,而对其增值能力无明显影响。