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目的:用蛋白质免疫印迹(Western blot,WB)方法检测贵州省部分神经系统疾病病人血浆中博尔纳病病毒磷蛋白抗体,分析总结神经系统疾病中该病毒感染情况及贵州地区该病毒感染的地域分布。
方法:本实验采用蛋白质免疫印迹(Western blot,WB)方法。收集贵州省神经系统疾病病人外周血98例,其中病毒性脑炎/脑膜脑炎68例,多发性硬化8例,帕金森病22例。收集其新鲜血浆于-20℃冻存。用BDV-P24重组蛋白、小鼠来源抗BDV-P24单克隆抗体以及辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG(H+L)分别作为抗原、一抗及二抗进行预实验;然后用不同稀释倍数的病人血浆、辣根过氧化物酶标记山羊抗人IgG(H+L)分别作为一抗、二抗,根据显色结果确定血浆、二抗的最适宜浓度。检测所收集血浆标本中是否含有BDVp24抗体,并对阳性血浆标本进行重复检验确认。最后采用SPSS17.0统计软件分析实验结果。
结果:98例神经系统疾病病人血浆中16例有抗BDVp24抗体阳性反应,阳性率为16.33%(16/98),100例健康对照中无阳性反应例数,两组间阳性率有差异(P<0.001)。其中病毒性脑炎/脑膜脑炎病人血液BDVp24抗体阳性率为13.24%(9/68);8例多发性硬化病人血液中2例有抗BDVp24抗体阳性反应;22例帕金森病病人血液中5例有抗BDVp24抗体阳性阳性反应。在68名病毒性脑炎病人中,BDVp24抗体阳性病人精神症状出现率为66.67%(6/9),BDVp24抗体阴性的脑炎病人中精神症状的出现率23.73%(14/59),两组间精神症状出现率有差异(x2=5.02,P<0.05)。阳性血浆来源于遵义地区5例,贵阳地区8例,毕节地区2例,黔南州1例,遵义地区与贵阳地区间阳性率有差异(P<0.05)。
结论:贵州省病毒性脑炎、多发性硬化及帕金森病患者存在BDV感染,BDV感染与该类神经系统疾病的发生可能存在相关性;博尔纳病病毒感染存在地域差别。