【摘 要】
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开花是高等植物生长发育进程中一个非常关键的阶段,在合适的时间开花对大多数植物的生存和成功繁衍极为重要。该过程受各种内源和外源因素影响,基于对拟南芥开花时间调控的研究,探明了在拟南芥中至少存在六种开花调控途径:光周期途径、春化途径、环境温度途径、赤霉素途径、年龄途径、自主途径。这些信号途径既彼此独立又相互交联,形成一个复杂的调控网络,实现对开花时间的精准控制。F-box蛋白FKF1（FLAVINBI
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开花是高等植物生长发育进程中一个非常关键的阶段,在合适的时间开花对大多数植物的生存和成功繁衍极为重要。该过程受各种内源和外源因素影响,基于对拟南芥开花时间调控的研究,探明了在拟南芥中至少存在六种开花调控途径:光周期途径、春化途径、环境温度途径、赤霉素途径、年龄途径、自主途径。这些信号途径既彼此独立又相互交联,形成一个复杂的调控网络,实现对开花时间的精准控制。F-box蛋白FKF1（FLAVINBINDING KELCH REPEAT F-BOX1）是拟南芥中重要的光周期开花调控因子。有研究表明,fkf1突变体在长日照条件下晚花。为进一步探究FKF1调控开花的分子机制,本论文通过生物信息学分析得到了几个可能与FKF1存在相互作用的开花因子。通过酵母双杂交实验初步验证了FKF1与FUL（FRUITFULL）互作。进一步通过其它生化实验验证了它们之间的互作;从转录水平和蛋白水平上分析了FKF1对FUL的影响;研究了FKF1与FUL之间的遗传关系。具体研究结果如下:（1）采用酵母双杂交,双分子荧光互补（BIFC）,免疫共沉淀（Co-IP）实验分析,发现FKF1与FUL蛋白在体外和体内存在直接相互作用。（2）半体内蛋白稳定性以及烟草系统体内蛋白稳定性实验分析发现FKF1并不影响FUL的蛋白水平。采用实时荧光定量PCR（q RT-PCR）比较分析fkf1突变体中FUL的表达以及ful突变体中FKF1的表达,发现FKF1能够正调控FUL的转录水平。这表明FKF1在转录水平上调节FUL的表达。（3）观察了长日照条件下35S-FUL-Flag和ful-8突变体的开花时间以及莲座叶数目,发现FUL过表达植株表现出早花表型,而ful突变体表现出晚花表型。分析FUL基因的时空表达,发现在花芽分化期FUL的转录水平逐渐上升。这表明FUL是开花正调控因子。（4）为了进一步研究FKF1与FUL蛋白在调控开花中的关系,利用遗传学分析发现,长日照条件下,与35S-FKF1-Myc植株相比,35S-FKF1-Myc/ful-8双突变体开花时间延迟,叶片数目明显增加,与ful-8突变体表型相似,表明FUL突变能够恢复35S-FKF1-Myc过表达植株的早花表型。开花时间整合子FT（FLOWERING LOCUS T）的表达在35S-FKF1-Myc中上调,在ful突变体中下调,在35S-FKF1-Myc/ful-8双突变体中的表达量则与ful-8突变体相似,说明FKF1与FUL在同一条通路上,通过促进FT的表达,进而促进开花。
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