【摘 要】
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本研究应用PK-15细胞分离培养猪瘟病毒（CSFV）梧州毒株（GXWZ02）经提纯作为抗原免疫小鼠建立分泌抗CSFV的McAb杂交瘤细胞株。该毒株经5代传代后能较好地适应传代细胞的生长,经测定
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本研究应用PK-15细胞分离培养猪瘟病毒（CSFV）梧州毒株（GXWZ02）经提纯作为抗原免疫小鼠建立分泌抗CSFV的McAb杂交瘤细胞株。该毒株经5代传代后能较好地适应传代细胞的生长,经测定其细胞毒的TCID50为106/ml。用提纯细胞毒作为抗原免疫小鼠,经3次免疫后效果显著,免疫的BALB/C小鼠血清猪瘟抗体效价达到1:32000。取免疫鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞常规方法融合,先后进行了两次融合,共有660融合孔,经间接ELISA筛选,融合的阳性孔共有468孔,选145个阳性融合孔进行有限稀释法克隆3次,获得了19株分泌抗CSFV的单克隆抗体McAb的杂交瘤细胞株,在-80℃超低温下保存3个月后复苏的各杂交瘤细胞仍然能稳定分泌抗CSFV的McAb。从中选取10株杂交瘤细胞制备腹水,间接ELISA试验检测选取的10株腹水单抗效价1:400-1:6400,效价最高的是1B3、2C6都达到1:6400,其次是2B5、2A6、1F4、1F8、1B7效价都达到:1:3200,1C7、2B3效价为1:800,最低的是1A9效价只达到1:200。免疫荧光试验（IFA）对McAb的特异性检测结果表明,这些单抗从1:50-1:400稀释后与接种GXWZ02毒的细胞能产生特异荧光反应,各单抗的稀释度:2C6为1:400,1F4、1F8、2A6、2B5、1B3、1B7为1:200,1C7、2B3为1:100,1A9为1:50。ELISA和IF鉴定试验确定为抗GXWZ02的单抗,这
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