生物活性多肽衍生库的组建及其构效关系研究

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多肽涉及生物体内各种细胞功能,人们已发现存在于生物体的多肽有数万种,并几乎参与所有细胞功能,如激素、神经、细胞生长和生殖等各个领域。研究生物活性多肽对相应体内过程的影响,对新药研发有重要意义。本工作主要针对具有重要应用背景的生物活性肽-SARS抗原肽及基质细胞衍生因子衍生多肽为研究对象,运用组合化学技术分别建立相应衍生肽库,对相应活性肽的结构与功能关系进行系统研究。论文的主要内容如下: 1.抗原多肽P50的衍生库构建及构效关系研究针对SARS抗原多肽P50,以长度扫描方式建立了不同长度的多肽库,并进一步对筛选得到的有效短肽片段采用AlaScanning、LysScanning及AspScanning策略分别对目标多肽的氨基酸残基扫描,建立相应的氨基酸迭代库,并运用经SARSSDNA疫苗免疫的BALB/c小鼠模型,通过酶联免疫吸附测定和酶联免疫斑点测定系统研究了该抗原多肽构效关系。发现其上特定氨基酸残基被替换后,刺激特异性T细胞产生细胞因子干扰素-γ(INF-γ)的能力减弱甚至消除。提示相关氨基酸残基是该抗原多肽与BALB/c小鼠I类主要组织相容性复合物(MHC-I)结合并与T细胞受体(TCR)相互识别的关键位点。 2.基质细胞衍生因子SDF-1α碳端区域的衍生库构建及构象性质研究以SDF-1α碳端长为23mer的区域为模板,从其N端开始依次缺失一个氨基酸残基,构建多肽序列库,用圆二色谱法(CD)测定每条肽在中性磷酸盐缓冲液及中性SDS-磷酸盐缓冲液中的二级结构。发现随肽链延长,其CD光谱行为呈规律性变化,进一步的研究仍在进行中。
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