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一、目的复发性生殖器疱疹(RGH)主要是由单纯疱疹病毒-2(HSV-2)感染生殖器部位皮肤粘膜所引起的炎症、水疱、溃疡性疾病,是最常见的性传播疾病(STD)之一。具有反复发作和缠绵难愈的特点。生殖器疱疹反复发作不仅给患者自己带来了沉重的心理负担和精神上的压力,而且影响家庭的稳定,从而导致患者生存质量低下,长期生活在性病的阴影之下。其长期的复发性和目前的不可治愈性,又加重了患者的经济负担。感染生殖器疱疹的孕妇会引起流产和新生儿死亡,并且生殖器疱疹反复发作的患者其宫颈癌、阴茎癌、前列腺癌和艾滋病的发生率明显上升。HSV感染增加了HIV感染的危险性,HSV-Ⅱ被视为HIV的辅助因子。因此HSV感染受到人们重视,Toll样受体(toll-like receptor,TLR)是机体通过感知微生物病原体并激活细胞直接产生免疫防御的天然免疫受体,是免疫细胞表面的模式识别受体(pattern recognition receptor,PRR),参与微生物病原体相关分子模式(pathogenassociated molecular patterns,PAMPs)的识别,从而诱导天然免疫应答。由于TLRs即能调节先天免疫,又能直接参与启动获得性免疫反应,因此TLRs对免疫系统功能有着非常重要的影响。TLR9主要表达于B细胞和浆细胞样前树突状细胞(plasmacytoidpredendritic cells,PDCs)内,可特异性地识别细菌和病毒DNA中丰富的未甲基化CpG基序(CpGDNA),通过MyD88依赖的信号传导途径激活NF-κB、AP1和IRF-7等转录因子和蛋白激酶,释放TNF-α、IL-6、IL-8等炎症介质和Ⅰ型干扰素(IFN-α/β),介导急性炎症反应,并发挥抗病毒作用。现有的证据表明,许多中药可通过多种途径或环节提高机体抗感染免疫力,由此不难推测,中药提高机体免疫系统对病原体的识别和杀伤能力,以及诱导、调节更有效的免疫防御反应,与TLR及其相关信号分子密切相关,二者之间存在着天然的联系。因此,根据中医理论,在宝贵的中医药资源中寻求高效价廉的抗病毒药物,具有重要的现实意义和社会意义。本文以TLR9作为检验指标来观察中药抗病毒胶囊制剂对复发性生殖器疱疹患者的影响,并观察中药抗病毒胶囊制剂对小鼠攻击HSV-2病毒后TLR-9及IFNα的作用,并初步探讨了其发病机理及中药抗病毒胶囊的作用机制,为生殖器疱疹的临床治疗和实验研究提供了一些新的思路和方法。二、方法1.临床研究选择合格的30例复发性生殖器患者作为受试对象,给予抗病毒胶囊观察患者治疗前与治疗后3个月TOLL样受体9的比较,同时对患者的平均复发频率(次/3个月)、皮损愈合时间与治疗前进行比较。2.实验研究分为2部分,第一部分选用C57BL/6小鼠,以抗病毒2号胶囊进行预防试验,提前7天给与抗病毒2号胶囊,然后攻击病毒后,12小时和7天后各取小鼠的血和阴道组织进行TLR9和IFNα检测。第二部分选用C57BL/6小鼠,以抗病毒1号胶囊进行治疗实验,以HSV-2病毒攻击阴道后,给与抗病毒1号胶囊服用,在攻击后12小时和7天后各取小鼠的血和阴道组织进行TLR9和IFNα检测。三、结果1.临床试验显示:患者治疗后的复发频率较治疗前明显减少,皮损愈合时间明显缩短(与治疗前比较,P均＜0.05,有显著性差异),治疗6个月与治疗3个月比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。2.患者治疗前TLR9含量与正常人比有统计学意义,且治疗后TLR9含量与治疗前相比差异无显著性。3.实验研究的预防试验显示,提前给予抗病毒2号胶囊喂食小鼠,攻击病毒后预防2组TLR9含量与阳性对照1组相比差异有统计学意义,与预防1组比较,差异有统计学意义,预防2组和阳性对照1组与正常组比较差异有统计学意义。4.实验研究治疗试验显示:在淋巴细胞TLR9含量显示:治疗1组与阳性对照1组相比差异无统计学意义,治疗1组和治疗2组相比亦差异无统计学意义。阴道组织均数比较:治疗2组与正常组比较、阳性对照1组与阳性对照2组、治疗1组与阳性1组、阳性1组与正常对照差异有统计学意义;治疗1组与治疗2组间比较无统计学意义。5.在两组试验研究IFNα检测显示:在预防试验中IFNα含量在四组间无统计学差异,但是从含量来讲,预防2组TLR9含量高于阳性对照1组基本,预防组和阳性对照组TLR9含量均高于正常组。在治疗试验中IFNα含量四组间有统计学差异,治疗1组与阳性对照1组之间差异有显著意义,治疗1组与治疗2组间比较差异无显著意义。阳性对照1组与正常对照组比较有统计学意义。四、结论1.以TLR9测定作为抗病毒胶囊的评价指标,观察到患者治疗前TLR9含量与正常人比有统计学意义,且治疗后TLR9含量与治疗前相比统计无显著差异。说明抗病毒胶囊可以维持TLR9含量,从天然免疫方面探讨抗病毒胶囊在免疫调节方面的作用机制;同时亦观察到中药抗病毒胶囊制剂患者经治疗后的复发频率较治疗前明显减少,皮损愈合时间明显缩短,表明中药抗病毒胶囊制剂在HSV-2侵袭人体后诱导天然免疫,服用中药后使TLR9表达维持高水平,从而启动后天免疫发挥抗病毒作用,有效地提高临床疗效,减少复发频率,缩短皮损愈合时间,减轻患者的痛苦。2.实验研究显示:在动物被HSV-2病毒攻击后,TLR9介导了HSV天然免疫,预防试验显示,中药提前喂食小鼠,中药的小分子可能与TLR9的活性部分结合,促进了TLR9活化,在病毒攻击时启动天然免疫时,TLR9含量增加;治疗试验显示,在病毒攻击时启动了天然免疫,经过中药治疗基本维持天然免疫。同时,预防和治疗实验显示:在启动天然免疫的同时,其信号传导的终点没有显著增加IFNα的量,可能是启动的1型IFN中的βγ或其他的细胞因子。