【目的】结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是一类在世界上具有高发生率的恶性肿瘤。相关统计表明,我国临床上被诊断出患结直肠癌的病例有着越来越年轻化的趋势,这个情况和最近十几年间国内经济快速发展有着一定的联系。人们在满足温饱之后为了生活质量而追求更多的食物量的摄入,导致人体每日吸收了过多脂肪和蛋白,使结直肠癌的发病率越来越年轻化,其发病率在40岁以下的人群中占总发病人数的1/5,且有着逐年继续上升的趋势。在世界上,我国已经进入了结直肠癌高发病率的行列。另外,结直肠癌又难以及时发现并治疗,导致在发现发病后往往已经处于中晚期阶段,这样给日后患者的预后和治疗造成了诸多困难。结直肠癌发病率的提高,以及其发现难度的增加导致的高死亡率,严重威胁着我国人民的身体健康。随着科技的进步、临床治疗的发展再结合癌症靶向治疗的进一步成熟,这在一定程度上改善了结直肠癌患者的治疗难度和预后。但是在处于结直肠癌晚期和转移的患者中,预后依然很差。为了达到增加结直肠癌患者生存率的目的,医学工作者一直在努力探究CRC的发病机理及探索新的,更有效的治疗策略。mi RNAs(micro RNA)定义为一类长度较短(片段总长约18-22nt),可以在转录后调控相关基因的表达的一类非编码RNA。有研究表明,在结直肠癌细胞中存在多种mi RNAs表达水平和其多个相关基因的改变。mi RNAs可以直接靶向多种癌基因,从而发挥其影响癌细胞生物学功能的作用,如影响恶性肿瘤细胞的一些恶性表型等等。但是其具体的复杂调控机制尚未完全明确,我们猜测mi RNAs影响结直肠癌细胞的各种生物学功能是由于其可以靶向调控相关癌基因而实现的。本课题目的在于研究mi R-621以及其对于它相应靶基因的调控作用相结合之后共同对结直肠癌细胞中相应多种生物功能的影响【方法】选择miR-621作为研究对象,首先用qRT-PCR可以验证miR-621在结直肠癌细胞中的表达量,而后构建pc DNA3/pri-mi R-621质粒,通过MTT、transwell迁移侵袭实验和集落实验验证了其对于结直肠癌细胞细胞功能的抑制作用。再通过生物信息学预测了mi R-621相关靶基因,并且构建靶基因的EGFP质粒后,用Western blot实验确定mi R-621可以直接靶定相应靶基因RPL15,再通过Western blot实验确定mi R-621对于其靶基因表达的影响。再者,MTT、transwell迁移侵袭实验以及集落可以研究靶基因对结直肠癌细胞活性和恶性表型的作用。实验最后,设计挽救实验验证mi R-621和其靶基因对于结直肠癌细胞生物学功能的影响。【结果】mi R-621在结直肠癌组织中的表达量要比其相应的正常癌旁组织中低。;mi R-621可以抑制结直肠癌细胞的功能;生物信息学预测显示RPL15是mi R-621的直接靶基因,构建其相应EGFP载体后Western blot实验证明了mi R-621可以直接靶定RPL15,并且mi R-621可以在一定程度上抑制靶基因RPL15的表达;直肠癌表型实验证明了靶基因RPL15可以在一定程度上促进结直肠癌细胞的恶性表型(如细胞活性,迁移侵袭及增殖能力等);设计挽救实验证明了mi R-621不仅自身可以抑制结直肠癌细胞的生物学功能,还能通过影响其靶基因RPL15的表达含量来增加它的抑制能力。【结论】miR-621可以抑制结直肠癌细胞的生物学功能,影响结直肠癌细胞的恶性表型(如结直肠癌细胞迁移侵袭能力,增殖能力,细胞活性等)。其还可以靶定RPL15并抑制RPL15的表达量,RPL15可以促进结直肠癌细胞相应生物学功能,所以mi R-621的抑癌作用在一定程度上是通过抑制其靶基因RPL15的表达来实现的。本文的实验结果证明了mi R-621可以抑制结直肠癌的表达,同时还可以通过抑制促癌基因RPL15的表达加强其对CRC的影响作用,抑制了结直肠癌的发生和发展,阐明了其具体作用机制。