目的:通过体外预刺激方法制备高干细胞活性与旁分泌功能的心肌球(cardiospheres,CSps)作为移植干细胞,在大鼠急性心肌梗死模型中建立心包腔内移植治疗途径,探究CSps移植后的疗效与相关再生机制。方法:从大鼠心脏分离培养CSps,免疫荧光鉴定心脏干细胞标记物的表达情况;使用不同浓度心肌梗死后心包积液(Pericardial fluid with myocardial infarction,PFMI)培养CSps,q PCR检测干细胞标记物(c-kit、Sca-1和KDR)、心肌细胞标记物(c Tn T)与生长因子(VEGF、b FGF、HGF和IGF-1)转录水平;与磷酸盐缓冲液对比,使用基质水凝胶混悬CSps置于4℃条件下,检测两者对细胞活性的影响;结扎冠状动脉左前降支制备急性心肌梗死模型,将Di R标记的CSps—基质水凝胶悬液注入大鼠心包腔,观察心梗4周内心功能与形态学变化,分析CSps体内存活,治疗效果及其治疗机制。结果:体外培养获得球状生长的CSps,使用50%心包积液预处理促进了CSps中干性基因(c-kit、Sca-1和KDR)、心肌细胞c Tn T和生长因子(VEGF、b FGF、HGF及IGF-1)的转录水平。基质水凝胶有效保护了CSps细胞活性;体内实验显示,经心包腔移植的CSps显著改善大鼠心功能,减少梗死面积;CSps移植4周后维持16.8%存活,心包腔内生长因子(VEGF、b FGF、HGF及IGF-1)含量显著提高,梗死心肌内可观察到心肌细胞和血管再生。结论:通过预刺激方法成功获得干细胞活性更优的CSps,心包腔途径移植CSps显著改善了心梗大鼠心功能,减少梗死面积,促进梗死区心肌细胞和血管再生。