意大利蜜蜂幼虫期和成蜂期饲粮K~+适宜水平的研究

来源 :山东农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dulcimerqin
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蜜蜂是全变态发育的昆虫,其个体发育要经过卵期、幼虫期、蛹期和成虫期4个时期。其中幼虫期营养对蜜蜂的发育和健康至为关键。矿物质对蜜蜂营养代谢、离子平衡、酶解过程具有重要作用,其中钾在维持内环境的稳态中有重要作用,参与蜜蜂机体内代谢,影响工蜂哺育力,作为酶的活化因子,是蜜蜂发育的必需元素。本研究以意大利蜜蜂为研究对象,以钾元素为试验材料,以新鲜蜂王浆、D-果糖、D-葡萄糖、酵母提取物、无菌水、葡萄糖酸钾等成分配制成不同K~+水平的幼虫饲粮,以啤酒酵母、膨化豆粉、玉米粉、葡萄糖酸钾等为原料配制成不同K~+水平的成蜂饲粮,通过测定不同钾水平饲粮对蜜蜂幼虫和成蜂发育及SH等相关基因表达的影响,探讨意大利蜜蜂幼虫期和成蜂期适宜的K~+水平。第一部分为意蜂幼虫饲粮中适宜钾水平的研究。本实验以新鲜蜂王浆、D-果糖、D-葡萄糖、酵母提取物、无菌水等成分配制成幼虫基础饲粮(BLD),饲喂对照组,其K~+水平为1.1mg/g;在基础饲粮中添加葡萄糖酸钾,分别配制成K~+水平为1.3mg/g,1.5mg/g,1.7mg/g,1.9mg/g,2.1mg/g,2.3mg/g,2.5mg/g,2.7mg/g,2.9mg/g的9种试验饲粮。移取1日龄工蜂幼虫1920只,分别置于48孔细胞培养板中。试验共分10组,每组4个重复,每个重复48只。对照组和试验组分别饲喂相应的饲粮。每天给幼虫更换饲粮,饲养幼虫直至羽化出房。测定化蛹率、羽化率、糖消化酶活性、SH等相关基因表达量等指标。结果如下:1、饲粮中钾水平影响幼虫化蛹率、羽化率。当K~+水平为1.5~1.7mg/g时,其化蛹率和羽化率最高,显著高于对照组和其它试验组(P<0.05);2、饲粮中不同K~+水平影响幼虫体重和初生重。K~+水平为1.5~2.1mg/g时,幼虫的体重最高,要显著高于对照组和其它试验组(P<0.05)。当钾离子水平为1.7mg/g时,幼蜂的初生重最高,要显著高于对照组和其它试验组(P<0.05);3、饲粮中K~+水平影响幼虫体内糖消化酶的活性。对照组幼虫的淀粉酶与蔗糖酶活性最高,显著高于各个试验组(P<0.05),而己糖激酶活性则以钾离子浓度为2.9mg/g的试验组最高,显著高于对照组和其它试验组(P<0.05);4、饲粮中K~+水平影响幼虫相关基因的表达。当钾离子水平为1.5~1.9mg/g时,其Vg、CAT、MRJP1三个基因的mRNA的表达量最高,显著高于对照组和其它试验组(P<0.05),而当K~+水平为2.5~2.9mg/g时,SH5-1和SH5-2两基因的mRNA的表达量最高,显著高于对照组和其它试验组(P<0.05),从分子水平上证明了K~+对意蜂幼虫发育有影响。第二部分为意蜂成蜂适宜钾水平的研究。本实验以新出房蜜蜂工蜂为实验动物。从姊妹蜂王群中,随机抓取新出房幼蜂(1日龄幼蜂)960只,随机分为6组(5个试验组,1个对照组),每组4个重复,每个重复40只。以啤酒酵母、膨化豆粉、玉米粉、葡萄糖酸钾等为原料配制种不同钾离子水平(0.85mg/g,1.1mg/g,1.35mg/g,1.6mg/g,1.85mg/g)5种饲粮,饲喂给试验组,对照组饲喂新鲜蜂花粉。蜜蜂分别置于蜂盒中,放入30~33℃,50R.H.的恒温恒湿培养箱内。试验期自1日龄幼蜂至蜜蜂自然死亡。测定化蛹率、羽化率、糖消化酶活性、SH等相关基因表达量等指标。实验结果如下:1、饲粮中K~+水平影响蜜蜂体重。当K~+浓度为1.1mg/g时,蜜蜂的体重最大,显著高于对照组和其它试验组(P<0.05);2、饲粮中K~+水平影响蜜蜂寿命和采食量。对照组的存活率要显著高于各试验组(P<0.05);对照组饲粮采食量最大,与钾离子浓度为1.1mg/g的组无显著差异(P>0.05),但显著高于其它四组(P<0.05)。3、饲粮中K~+水平影响蜜蜂糖消化酶活性。当K~+浓度为0.85mg/g时,淀粉酶活性最高,显著高于对照组和其它试验组(P<0.05);当K~+浓度为1.6~1.85mg/g,蔗糖酶活性最高,要显著高于对照组与其它试验组(P<0.05);当K~+浓度为1.6~1.85mg/g时,其己糖激酶活性最大,显著高于对照组与其它试验组(P<0.05);4、饲粮中钾离子水平影响蜜蜂SH等相关基因的表达。当K~+水平为0.85~1.35mg/g时,SH5-1和SH5-2两基因的mRNA的表达量最高,要显著高于对照组和其它试验组(P<0.05),而当K~+水平为0.85、1.15mg/g时,CAT、MRJP1、Vg三基因的mRNA的表达量最高,要显著高于对照组和其它试验组(P<0.05)。本研究表明:蜜蜂饲粮中K~+水平影响蜜蜂化蛹率、羽化率、体重、采食量、糖消化酶活性、SH等相关基因表达。幼虫饲粮中适K~+水平为1.3~1.9mg/g;成蜂饲粮中适宜K~+水平为1.1~1.6mg/g。
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