锥叶柴胡化学成分和质量研究

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柴胡为常用的大宗药材,有着悠久的应用历史。具有和解表里,疏肝,升阳的功能,有保肝、解热、抗肿瘤等药效作用。《中国药典》2010年版收载的柴胡为伞形科植物柴胡Bupleurum chinense DC.或狭叶柴胡Bupleurum scorzonerifolium Willd.的干燥根。按其性状不同,习称“北柴胡”及“南柴胡”。柴胡属植物众多,分布广泛,在产地均作柴胡药用,造成了柴胡的品种问题。本论文对河北祁州药市交易的内蒙产非药典品种“海拉尔”柴胡进行了研究。经研究确定其原植物为同属植物锥叶柴胡Bupleurum bicaule Helm。“海拉尔”柴胡在哈尔滨三棵树药材市场也以药用柴胡大量出售。一、文献综述:对柴胡、锥叶柴胡及柴胡属多种药用植物的研究资料进行了查阅总结,从本草考证、原植物形态、药源调查、鉴定、质量、化学成分和药理作用等方面进行了文献综述。并用Microsoft Access软件建立了柴胡信息数据库,便于相关资料管理和查询。对锥叶柴胡的研究内容不多,只有植物形态及性状的研究。二、实验部分的研究结果:(一)对内蒙古自治州海拉尔区产柴胡(锥叶柴胡)进行了调查采集和鉴定研究,根据植物形态和果实显微特征,药用部位根的性状与显微特征,确定海拉尔区产柴胡的原植物为伞形科植物锥叶柴胡Bupleurum bicaule Helm.(二)采用药材性状鉴别、显微鉴别和理化鉴别三种方法,对采自内蒙的锥叶柴胡的根和祁州药市的“海拉尔”柴胡进行了鉴定研究,确定了祁州药市的“海拉尔”柴胡的来源为伞形科植物锥叶柴胡Bupleurum bicaule Helm的干燥根。(三)锥叶柴胡化学成分研究1、首次对锥叶柴胡挥发油成分进行了成分分析,结果与柴胡属的挥发油成分相似。但是和北柴胡的挥发油成分差异显著,两者没有共有成分。含量前三位的是1,2,3,6,7,8,8a,8b-八氢-4,5-二甲基-联苯撑17.43%,11-氧杂四环[5.3.2.0(2,7).0(2,8)]十二烷基-9-酮12.68%和(R)-1-甲基-4-(1,2,2-三甲基环戊基)-苯10.36%。2、本文对锥叶柴胡的皂苷类化学成分进行了提取分离和鉴定,其乙醇提取物用AB-8大孔树脂富集,硅胶柱层析分离,得8个化合物。用波谱解析、化学分析的方法鉴定7个化合物的结构,分别是:柴胡皂苷元F (saikogenins F)、柴胡次皂苷G (prosaikosaponin G)、柴胡皂苷d (saikosaponin d)、柴胡皂苷a(saikosaponin a)、柴胡皂苷b2 (saikosaponin b2)、柴胡皂苷c (saikosaponin c)。均为首次从锥叶柴胡中得到。(四)含量测定1、锥叶柴胡主要皂苷类成分的含量测定采用高效液相色谱法测定了锥叶柴胡中的柴胡皂苷a、c、d含量。三批锥叶柴胡的柴胡皂苷a、d、c分别在6.64~7.25(mg/g),14.61~15.71(mg/g),2.76~3.20(mg/g)波动。平均含量分别为7.12 (mg/g),15.17 (mg/g),3.00 (mg/g)。三批柴胡的总皂苷平均含量为25.23(mg/g)。测定的两批北柴胡的柴胡皂苷a、d、c平均含量分别是10.77 (mg/g),12.55 (mg/g),2.08 (mg/g).两批北柴胡的总皂苷含量为25.40(mg/g)。比较两种柴胡发现,锥叶柴胡的柴胡皂苷d含量偏高,两者总皂苷含量相差不大。2、挥发油的含量测定采用药典附录的挥发油测定法的甲法,测定了锥叶柴胡挥发油的含量,出油率为0.19%。(五)锥叶柴胡指纹图谱的初步研究采用高效液相色谱法,初步研究了锥叶柴胡的化学成分指纹图谱。确定了27个共有峰。(六)起草了锥叶柴胡的质量标准,为其临床应用提供理论基础。以上研究表明,锥叶柴胡的主要化学成分与2010版药典收载的北柴胡主要化学成分分相似,可作为柴胡类药材使用,以缓解野生北柴胡资源的不足,具有开发前景和应用价值。但是挥发油成分差异较大,是否具有相同药效尚待进一步药理研究。三、本论文的创新点1、首次确定了祁州药市的“海拉尔”柴胡的来源为伞形科植物锥叶柴胡Bupleurum bicaule Helm的干燥根。2、为首次对锥叶柴胡的挥发油和皂苷类化学成分进行了研究,分离鉴定了7个皂苷类化合物。3、首次起草制定了锥叶柴胡的质量标准,为其应用提供理论基础。
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