骨形成蛋白(bone morphogenetic proteins，BMPs)，通常也称之为骨形态发生蛋白或骨生成素，是一类广谱性的生长调节因子。已有的研究表明，BMPs的功能不仅仅局限于能诱导未分化的间充质细胞不可逆地转化为软骨和骨，BMPs还对组织器官的胚胎发生和形态形成起重要作用。另外，BMPs还参与调节包括间充质细胞、上皮细胞、造血细胞和神经细胞在内的多种细胞的增殖、分化、趋化性和调亡。 有研究表明，不同种BMP实现共表达后，活性比单种表达时有显著的提高，如人骨形成蛋白-4(hBMP4)与人骨形成蛋白-7(hBMP7)在CHO细胞实现共表达后，活性比人骨形成蛋白-4单种表达时提高5倍另有研究表明，BMP异源二聚体的生理效应要比同源二聚体高10～20倍之多。因此，本研究尝试利用hBMP4和hBMP7的成熟肽cDNA片段制备转基因酵母菌株，从而对hBMP4与hBMP7在毕赤酵母细胞共表达的实现和hBMP4／7异源二聚体的形成进行探讨。 本论文的主要工作包括hBMP4与hBMP7在毕赤酵母细胞中共表达技术的建立：hBMP4与hBMP7的发酵工艺；蛋白纯化工艺；抗原反应活性及理化性质的研究。 摇瓶培养确定最适培养基为BMGY／BMMY；培养基的最适pH值为6.0；最佳甲醇诱导浓度为1％；最适诱导周期为96小时。 经斑点印迹和蛋白质印迹证实了表达产物含有hBMP4与hBMP7，均具有良好的抗原性和特异性。 经还原性和非还原性SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结合蛋白质印迹鉴定，所获得的hBMP4与hBMP7为单体蛋白，分子量分别为26KD和17KD。 利用Bradford蛋白质定量法并结合Glyko BandScan量化软件的分析发现，表达上清中hBMP4表达量达到33.34mg／L，占总蛋白含量的50.4％，hBMP7的表达量达到13.76mg／L，占总蛋白含量的20.8％。 用阳离子交换层析法结合疏水柱层析法进行纯化，最终纯化得到的目的蛋白纯度达到80％以上。