汞是自然界中分布非常广泛的一种元素,也是唯一的液体金属。几乎在所有的矿物质中都有汞的存在,作为工业生产和科学研究的一种重要物质,汞不仅存在于自然界中,也渗透到人们的生活之中,并发挥着重要作用,然而由于汞本身含有剧毒,因此汞也给人类的生活带来了巨大的灾难。由于汞的存在形式因不同的条件而发生变化,因此要想解决汞带来的危害,对于汞的化学形态的研究就显得非常重要。本文第1章绪论简介了汞的危害、毒性、中毒机理及解毒方法,以及贵州万山地区汞的污染和防治,并介绍了几种常用于汞的分析测试仪器的工作原理和仪器构造,阐述了本论文的研究意义和主要研究内容。第2章介绍了HG-AFS测汞条件的建立和优化,比较了几种不同试剂清洗HG-AFS进样系统和雾室的效果,并对头发作为汞暴露人群中汞符合生物标志物的再研究。结果表明,2-巯基乙醇可以作为最优清洗剂,发现评价汞暴露尤其是无机汞暴露的人群中汞负荷时,头发并不是合适的生物标志物。第3章介绍了HG-AFS测定贵州汞暴露人群尿样及血液中汞的含量。结果表明,补硒后,志愿者在d60时全血中汞未发现显著性变化;尿中汞含量变化较慢,在补硒的前7天,尿中汞的变化无显著性差异,直至d30才发现比d0有显著性增加,之后的d45、d60及d90均发现了尿液中汞含量的显著性增加。从性别上来看,补硒后不同性别的志愿者其全血内的汞含量在d30及d60时出现显著性差异;补硒后男性志愿者,除d7、d45及d75外,其余隔天尿中汞含量均明显高于女性志愿者。男性志愿者补硒后其尿液内汞含量在d60及d90时发生显著性升高,而女性尿液中汞含量在d6、d7、d30、d45、d60、d75及d90时均发生显著性升高。第4章主要建立了反相色谱-氢化物发生原子荧光光谱联用测定血清中汞形态(无机汞和甲基汞)的方法,优化了载流液,还原剂以及2-巯基乙醇的浓度,以正辛醇作为消泡剂,成功地解决了测定血清样品时原子荧光仪器内气液分离器中产生大量泡沫的难题。采用反相色谱柱对无机汞和甲基汞形态进行了分离,回收率在95%~110%之间,无机汞和甲基汞的精密度RSD(n=7)分别为3.26%和3.98%,二者的检出限分别为0.28μg/L和0.11μg/L。当无机汞和甲基汞形态浓度范围为2~30μg/L时,两种形态均可得到良好的线性关系,线性相关系数均大于0.9990。通过测定标准物质人发(GBW 07601)和鱼样(IAEA MA-B-3/TM)用以评价方法的可靠性。本方法简便快速,灵敏度高,已成功应用于分析长期汞暴露地区人群口服补硒后血清中汞的化学形态并准确定量,结果发现硒能促进该地区人群体内汞的排出。第5章主要通过在同位素稀释与电感耦合等离子体质谱联用(ID-ICP-MS)的基础上运用亲和色谱住(AF)分离了长期汞暴露地区人群补硒后血清中三种硒蛋白:谷胱甘肽过氧化酶(GPx),硒蛋白P(SelP)和硒代白蛋白(SeAlb),并准确定量了硒蛋白P中汞的含量。采用反相色谱与电感耦合等离子体质谱联用分离了两种形态的汞(甲基汞和无机汞)。以铟作为内标,含0.1%巯基乙醇的0.1%HNO3作为稀释液,用电感耦合等离子体质谱测定了总汞含量。实验回收率为97.8%,甲基汞,无机汞及总汞测定的检出限分别为2.1μg/L,2.3μg/L及0.15μg/L,其中硒蛋白P中汞的检出限为0.8μg/L。第6章主要建立了一种利用阴离子交换高效液相色谱与氢化物发生原子荧光光谱联用同时测定四、六价硒及硒代半胱氨酸(SeCys)形态的方法。优化了六价硒的还原条件及仪器检测参数,以不同浓度的柠檬酸铵作为流动相,流动相A为0.5 mmol/L柠檬酸铵溶液,pH值3.7,流动相B为100 mmol/L柠檬酸铵溶液,pH值8.0。当利用85%A+15%B作为流动相时,在10min内同时分离了四、六价硒及硒代半胱氨酸(SeCys)。采用加标法定量,加标回收率在90%～119%之间,5次测定的相对标准偏差为1.6%~3.1%(100μg/L),四、六价硒及硒代半胱氨酸(SeCys)的检出限分别为0.32μg/L、0.47μg/L和0.44μg/L(进样量为100μL)。应用该法对长期汞暴露人群补硒后尿中的小分子硒的形态进行了分析,仅检测到硒代半胱氨酸(SeCys),且补硒后尿中总硒及硒代半胱氨酸(SeCys)含量均有所增加。