【摘 要】
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利用Bac-to-Bac?真核表达系统体外过表达并纯化得到具有较高天然生物活性的外源蛋白,是进行蛋白质功能研究采用的方法之一。疱疹病毒科保守性蛋白激酶(conserved herpesvirus
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利用Bac-to-Bac?真核表达系统体外过表达并纯化得到具有较高天然生物活性的外源蛋白,是进行蛋白质功能研究采用的方法之一。疱疹病毒科保守性蛋白激酶(conserved herpesvirus protein kinases, CHPKs)在疱疹病毒生长复制过程的生物学作用一直是疱疹病毒研究的热点,然而在不同疱疹病毒科成员之间,CHPKs对病毒的生长复制的影响不同。本研究利用Bac-to-Bac?真核表达系统体外表达马立克氏病病毒(Marek’s disease virus, MDV)UL13蛋白激酶,成功构建了rBac-His-UL13, rBac-His-EGFP和rBac-His三种重组杆状病毒,同时通过对UL13蛋白和EGFP蛋白表达和收获条件进行优化,确定了UL13蛋白和EGFP蛋白的最佳表达条件和蛋白收获时间。初步建立基于Bac-to-Bac? HT载体的真核表达蛋白质纯化平台,为研究MDV UL13蛋白激酶的生物学功能提供必需的研究材料。通过体外蛋白摄入的方法研究MDV UL13蛋白激酶对MDV生长的影响,结果发现:MDV UL13蛋白激酶对RB-1B病毒空斑大小的形成无明显影响。利用基因免疫法制备抗MDV UL13全长蛋白的多克隆抗体,并利用不同方法制备的抗MDV UL13蛋白激酶的抗体对MDV UL13蛋白激酶进行了细胞内表达的检测,同时应用绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein,GFP)与UL13蛋白激酶融合表达进行UL13蛋白激酶的进一步细胞内定位,证明了MDV UL13蛋白激酶定位于细胞核内。
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摘 要: 《电子金融》是电子商务专业的核心课程,金融电子化和金融业中使用的技术不断发展,所以《电子金融》课程的教学不能只拘泥于课本。开放式教学强调学习者的主动探究和亲身体验及基于真实任务的研究问题的解决。本文从电子商务专业《电子金融》课程的教学实际出发,探索出一些通过开放式教学促进高职学生的综合素质提高的方法,并通过学生反馈,总结出开放式教学模式应用中仍需要不断完善和注意的问题。 关键词: 电子
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