系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞PRKCB基因mRNA表达的研究

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背景系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus,SLE)是一种累及多脏器的自身免疫性疾病。该病目前的病因和发病机制仍未明确,多认为是遗传因素和环境因素共同作用下所导致。遗传因素研究方面,由于人类基因组计划以及国际人类基因组单体型图计划的完成,使得全基因组关联研究(Genome-wide association study,GWAS)得以实现。GWAS揭示遗传性疾病的易感基因和位点,为研究疾病病因、发病机制、诊断标准、治疗等方面提供全新的思路。GWAS目前已确证多个SLE的易感基因/位点,全基因组关联后续研究又进一步发现潜在的遗传多态性与疾病进展之间的生物相关性。本课题组前期完成了中国汉族人群SLE的全基因组关联研究,发现多个易感基因和位点,并以此为基础通过全基因组关联后续研究,发现位于16p11.2的PRKCB基因(OR=0.81,95%CI:0.76-0.87,P=1.35×10-9)与SLE易感性密切相关。目的探讨PRKCB基因在SLE患者和正常对照中m RNA的表达情况,以及PRKCB基因m RNA的表达水平与SLE活动指数(SLEDAI)、SNP rs16972959基因分型的关系,揭示PRKCB基因在SLE发病中的相关作用机制。方法本研究收集60例SLE患者和62例正常对照的血样和临床相关资料。首先从血样的外周血单个核细胞(PBMCs)中提取出m RNA并且逆转录为Complementary DNA c(c DNA),接着利用ABI7900型高通量荧光定量PCR技术测定外周血单个核细胞中PRKCB基因m RNA的表达量的情况,再提取血样DNA并进行浓度标准化,接着通过Sequenom Mass Array基因分型技术对122个样本的SNP rs16972959位点进行处理,最后整合所有实验数据利用SPSS20.0软件对数据进行分析。结果SLE患者外周血单个核细胞中PRKCB基因的m RNA表达水平高于正常对照,且两者之间对比统计学上具有显著差异性(P<0.001);SLE患者外周血单个核细胞中PRKCB基因m RNA表达水平与SLE疾病活动指数之间呈负的相关性,并具有差异(P<0.05,r=-0.322);PRKCB基因的m RNA表达水平与rs16972959的基因型之间无相关性。结论PRKCB基因表达的差异提示该基因在SLE的发病机制中可能起到一定的作用。
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