人类血栓反应素hPWTSR初步功能及在胃癌中的表达研究

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目的研究人类血栓反应素hPWTSR的生物学功能和功能机制,探讨hPWTSR在人类胃癌发生发展中的可能作用及作为诊断和干预位点的潜在价值。方法以pLexA-hPWTSR作为诱饵,在pB42AD-胎脑cDNA文库中利用酵母双杂交检测起相互作用蛋白,揭示hPWTSR的功能与功能途径;利用RT-PCR技术检测胃癌细胞系和临床样本中hPWTSR的表达情况,评估hPWTSR作为胃癌诊断参考标记的潜在价值。结果扫描10~7个独立克隆分离到57个hPWTSR的相互作用克隆。PCR在57个克隆获得扩增,随后的序列分析发现57个独立的阳性克隆代表12个基因产物。其中包括黏附相关蛋白基因ARDM1、RPSA和接头相关蛋白复合体Mu1亚基AP2M1,肿瘤相关基因TACC2、SH3GL21和MAGEA1,蛋白质合成相关蛋白RPS9、RPS15、HSPCA、EXOSC和细胞浆HSP90A,蛋白质代谢相关蛋白PSMB4。酵母交配试验验证上述作用。基于RT-PCR的表达谱分析发现,hPWTSR在胃癌细胞系和临床标本中的表达水平有不同程度的下降。结论hPWTSR的相互作用蛋白谱提示其参与细胞黏附、信号传导等多种生物学过程,因而可能与肿瘤的发生具有一定的功能联系;hPWTSR在胃癌细胞系和胃癌样本中的表达水平不同程度下降提示其是一个潜在的胃癌标记物,但是在胃癌发生及发展过程中的分子作用机制及确切的临床价值有待进一步的功能研究和大样本的临床表达谱研究来证实。
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