目的：构建携带Lipocalin2基因的条件增殖型溶瘤腺病毒NV-lipocalin2，并应用体外细胞学实验方法研究NV-lipocalin2抗大肠癌的作用及其机制。　　方法：利用RT-PCR技术获取目的基因Lipocalin2并将其克隆至pCA13质粒,构建重组的质粒pCA13-lipocalin2。使用BglⅡ酶从pCA13-lipocalin2质粒中酶切出包含lipocalin2基因及CMV启动子的表达框,把该表达框再亚克隆入质粒pZD55,获得重组质粒pZD55-lipocalin2。之后分别将pCA13-lipocalin2和pZD55-lipocalin2与pBHGE3共转染到293细胞,经过同源重组产生携带lipocalin2基因的靶向性溶瘤腺病毒（NV-lipocalin2）。并用PCR方法和wester-blot方法对新构建的病毒从基因和蛋白水平进行鉴定。把获得的NV-lipocalin2病毒按不同浓度加入到大肠癌细胞SW480中，采用四甲基偶氮哩盐叮（MTT）法检测其对肿瘤的增殖抑制效应，以及其分别与中药姜黄素和化疗药物5-FU的协同抗肿瘤作用,采用Annexin V/PI染色流式检测细胞凋亡,采用透射电镜观察肿瘤细胞的凋亡，最后采用wester-blot法,检测凋亡相关基因Caspase-3，9的蛋白表达,以研究NV-lipocalin2诱导大肠癌细胞凋亡的机制。　　结果：通过PCR鉴定病毒DNA序列显示：NV-lipocalin2保留了E1A区缺失了E1B55序列。借助lipocalin2的CDS区设计的引物能从构建的病毒中扩增出相应的目的基因条带；同时采用wester-blot法可检测到被腺病毒感染的SW480细胞强表达Lipocalin2蛋白。重组的靶向性增殖型腺病毒抗大肠癌SW480细胞的作用优于单存的病毒载体（ZD55），其抗癌作用呈时间依赖性和浓度依赖性，其与中药姜黄素和化疗药物5-FU都有很好的协同治疗作用并呈浓度依赖性。NV-lipocalin2可通过活化Caspase-3,9从而引起大肠癌细胞的凋亡，其对Caspase-3，9的活化能力也具有浓度和时间依赖性。这为研究其抗大肠癌作用提供了依据。　　结论：成功构建了携带人lipocalin2基因的靶向性溶瘤腺病毒NV-lipocalin2,重组的腺病毒具有明显的病毒和基因协同抗大肠癌的作用，具有与中药姜黄素和化疗药物5-FU的协同抗肿瘤作用。它能通过Caspase依赖的凋亡通路启动大肠癌细胞的凋亡。