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背景:类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种全身性的炎性疾病,通常呈慢性疾病状态,可造成患者功能丧失并且死亡率升高。其患病率为0.34~0.36%,在我国,类风湿关节炎女性发病率高于男性,约2-3:1,任何年龄均可发病,以20-50岁居多,病程5-10年的致残率高达60%。类风湿关节炎患者一经诊断后,应在6月内开始以改善病情抗风湿药(DMARDs)为主,并联合小剂量糖皮质激素的治疗方案,其中甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)是治疗类风湿关节炎的锚定药,另外如柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine,SSZ)、羟氯喹(hydroxychloroquine,HCQ)等均已列入类风湿关节炎诊疗指南中。本研究小组前期的系列研究主要针对耐药蛋白P-gp,探索其与RA患者MTX/CTX耐药的关系,得到如下结论:1、RA患者外周血淋巴细胞中P-gp的表达水平和疾病活动度平行,DMARDs疗效下降与其表达增加有关;2、RA患者外周血淋巴细胞以及滑膜成纤维细胞中P-gp表达水平在高IL-6环境中可升高;3、IL-6可通过ERKl/2及JAK2-STAT3信号通路调控RA患者外周血淋巴细胞P-gp的表达和功能;4、RA患者外周血淋巴细胞中P-gp的表达水平与炎性细胞因子IL-17有一定的浓度、时间依赖性;5、MTX联合CTX可减轻单用MTX对JAK2-STAT3信号通路的激活作用,从而降低P-gp表达水平,故而MTX周期联合CTX可能一定程度上逆转耐药。但是,另外一种ABC转运蛋白乳腺癌耐药蛋白(BCRP/即ABCG2)在RA患者外周血淋巴细胞表达如何?其介导的多药耐药又与哪些细胞因子的调控有关呢?这是本研究的科学问题。BCRP/ABCG2是一种半转运蛋白,所以需要至少两个结合域才能起到药物流出泵的作用,在功能状态下,BCRP/ABCG2以二聚体或者多聚体的形式存在。在白血病和肿瘤耐药机制的基础研究中,结果发现高表达的BCRP/ABCG2与疾病临床不缓解和预后不良有关。本课题探究BCRP是否在RA患者高表达,并明确其与细胞因子是否相关,从而介导RA的多药耐药。目的:1、通过测定不同疾病活动度RA患者外周血淋巴细胞表面BCRP表达水平,明确其与疾病活动度是否有关;2、探讨RA患者外周血淋巴细胞表面BCRP表达水平与细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17、IL-10等)是否相关,旨在研究BCRP介导的多药耐药与炎性细胞因子是否相关。方法:纳入经治的类风湿关节炎患者35例,按照疾病活动度分为缓解、低、中、高四组,以及7例健康对照组,RT-PCR检测淋巴细胞中BCRP mRNA基因表达水平,CBA技术检测血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17、IL-10及IL-2含量。结果:1、RT-PCR检测各组BCRP mRNA水平:与健康对照组相比,RA组淋巴细胞中BCRP表达水平明显升高(P<0.05);各组间mRNA水平有统计学差异(P<0.05),但两两比较发现健康对照组与高疾病活动组有统计学差异(P=0.025),其余两两之间均无统计学差异。2、外周血淋巴细胞BCRP m RNA水平与疾病活动度相关性:外周血淋巴细胞BCRP m RNA水平与疾病活动度相关性检测无统计学意义,不能认为两者之间存在相关性,但呈正相关趋势。3、CBA技术检测各组外周血血清中细胞因子水平:与健康对照组相比,RA组IL-1β、IL-17、TNF-α水平明显升高(P<0.05);IL-2、IL-6、IL-10两组间差别无统计学意义;4、各细胞因子与BCRP mRNA表达水平相关性:IL-6、TNF-α与BCRP mRNA水平有相关性,且呈正相关;IL-2、IL-1β、IL-17、IL-10经过验证无明显相关性。结论:1、RA患者外周血淋巴细胞表面BCRP表达水平较正常人明显升高,但与疾病活动度之间无直接关系;2、IL-6、TNF-α升高可能介导RA患者外周血淋巴细胞表面BCRP高表达从而介导多药耐药。