【摘 要】
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本论文以胰脂肪酶抑制活性筛选为指导,对贵州红茶进行分段分离,筛选得到了其主要的抑制胰脂肪酶的活性部位,并对该部位及其中的主要代表性成分对胰脂肪酶抑制活性进行了初步
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本论文以胰脂肪酶抑制活性筛选为指导,对贵州红茶进行分段分离,筛选得到了其主要的抑制胰脂肪酶的活性部位,并对该部位及其中的主要代表性成分对胰脂肪酶抑制活性进行了初步研究。首先,对贵州红茶甲醇提取物进行溶剂萃取分段,得到不同极性的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和水部位,在p H=8.0、37℃条件下,使底物和胰脂肪酶反应15 min后,加入不同部位的样品,测定了不同浓度样品对胰脂肪酶的抑制率,发现其中乙酸乙酯部位的活性最高。然后,利用色谱方法,对乙酸乙酯部位进行进一步的分段,分别考察各段的胰脂肪酶抑制活性,得到了较为活性集中的小部位以及主要活性成分咖啡因。采用Folin酚比色法,测定了不同部位中多酚性组分含量,用UPLC法测定了咖啡因含量,并采用UPLC方法,对各个部位的组成进行了初步的讨论。根据活性大小情况,初步讨论了红茶中对胰脂肪酶具有抑制活性的物质基础。最后,对活性较为集中的乙酸乙酯部位和红茶中代表不同化合物类型的咖啡因、EGCG、茶黄素的胰脂肪酶抑制活性及其机理进行研究。结果表明:①通过对贵州产红茶的胰脂肪酶抑制活性的筛选跟踪,可得红茶的活性部位为乙酸乙酯部位;②通过对红茶乙酸乙酯部位进一步分离,根据活性分布得到不同抑制活性的部位以及主要的活性成分咖啡因。测定活性部位的总多酚和咖啡因含量,发现多酚和咖啡因都对胰脂肪酶抑制活性有贡献,其中咖啡因的作用更加显著,是红茶抑制胰脂肪酶活性的主要活性成分;③红茶乙酸乙酯部位和红茶中主要活性成分多酚类儿茶素化合物的代表EGCG、儿茶素氧化聚合物代表茶黄素以及生物碱成分代表咖啡因的胰脂肪酶抑制机理研究表明红茶乙酸乙酯部位、EGCG、茶黄素和咖啡因对脂肪酶的抑制类型均为非竞争性抑制。
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