论文部分内容阅读
[目的]研究RNA干扰技术沉默CTHRC1基因表达对黑素瘤A375细胞迁移的影响及CTHRC1与Wnt通路相关分子β-catenin和Wnt5a在色素痣和黑素瘤不同发展阶段中的表达,探讨三者在黑素瘤发生、发展过程中的可能作用及相关性。 [方法]体外化学合成CTHRC1基因序列特异性双链小干扰RNA(CTHRC1-siRNA),转染A375细胞株,Realtime-PCR和WesternBlot检测CTHRC1的表达情况,采用Transwell小室检测细胞的迁移能力;采用免疫组织化学法检测色素痣、原位黑素瘤、侵袭性黑素瘤和转移性黑素瘤组织中CTHRC1、β-catenin和Wnt5a蛋白的表达,结合临床病理特征进行分析。 [结果]CTHRC1-siRNA能有效抑制CTHRC1的表达,转染后的细胞迁移力明显下降(P<0.05)。黑素瘤组织中CTHRC1、β-catenin和Wnt5a的阳性表达率均高于色素痣(P<0.05);CTHRC1、β-catenin的阳性表达与黑素瘤的浸润深度和淋巴结转移相关(P<0.05),Wnt5a的阳性表达仅与淋巴结转移相关(P<0.05);CTHRC1与β-catenin蛋白之间以及CTHRC1与Wnt5a蛋白之间的阳性表达在黑素瘤中存在明显正相关性(P<0.01)。 [结论]沉默CTHRC1基因表达可以抑制黑素瘤A375细胞的迁移。CTHRC1、β-catenin和Wnt5a蛋白在黑素瘤组织中的表达异常升高。随着肿瘤浸润的加深和淋巴结的转移,CTHRC1、β-catenin的表达逐渐升高;Wnt5a的表达随淋巴结的转移而升高。CTHRC1可能作为Wnt信号通路的辅助蛋白促进黑素瘤的发生和发展。