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目前,随着生活水平的日益提高,人们越来越重视自身的保健,中药材以其较小的副作用越来越受到人们的青睐。巴戟天作为四大南药之一,是中药材中常用的品种之一,其主要成分为蒽醌类化合物、糖类、有机酸类、氨基酸类、环烯醚萜类以及人体所必须的微量元素,具有补肾阳、强筋骨、祛风湿、抗抑郁等功效。随着现代医学技术的不断发展以及对巴戟天开发不断深入,巴戟天的应用范围不断扩大,市场需求量逐年增加。由于长期的滥采滥挖,巴戟天野生资源受到较大的破坏,而巴戟天栽培种的产量和质量不能满足市场的需要。本研究对筛选出的巴戟天优良材料进行组织培养苗木快速繁殖研究,为保护巴戟天野生种质资源及实现巴戟天的工厂化育苗提供技术支撑,进而促进巴戟天中药材的现代化进程,具有重要的现实意义。主要研究结果如下:1.巴戟天优良材料的筛选。采集长势好、无病虫害巴戟天单株35株,测量出巴戟天各单株的藤条长度、分支数、地径、地上、地下生物量;运用超声波法提取巴戟天多糖,苯酚-硫酸法测定多糖含量。以单株产药部位产量、多糖含量、多糖总量为主要筛选指标,其他各生物性状指标为参考,分析比较筛选出巴戟天优良单株A1号A2号及B1作为优良材料用于组培快繁实验研究。2.巴戟天无菌体系的建立。此实验为巴戟天优良材料组培实验的预实验。分别从消毒处理、取材月份、取材时间以及外植体木质化程度四个方面进行了研究:(1)采用10种不同消毒方式对巴戟天茎段外植体进行处理,通过对污染率、褐化率及成活率的统计分析,实验表明0.1%升汞8min+2%次氯酸钠10min的消毒处理,其污染率42.11%,褐化率21.05%,均比较低,成活率52.63%为所有处理中最高。该处理是巴戟天茎段外植体消毒的最好方法。(2)研究了采取外植体的月份对巴戟天消毒处理效果的影响,实验分别于4月、7月、8月及10月采取巴戟天外植体,采用0.1%升汞8min+2%次氯酸钠10min消毒处理,研究发现7月份的成活率最高为56.83%,8月仅次于7月,而4、10月份的成活率低于7至8月份。7月份为巴戟天外植体采集的最佳月份。(3)研究了取材时间对巴戟天消毒处理效果的影响。实验分别于的阴雨天、晴天上午08:00-10:00点、下午的14:00-15:00以及连续3天及以上无雨的14:00-15:00采集巴戟天外植体,采用0.1%升汞8min+2%次氯酸钠10min消毒处理,研究结果表明连续3天及以上无雨的14:00-15:00采取茎段外植体培养,污染率最低,成活率最高,达到48.89%。连续晴朗3天及以上的午后取材为宜。(4)研究了巴戟天茎段的木质化程度对外植体消毒效果的影响。分别将巴戟天茎段外植体分为三个外植体木质化程度,采用0.1%升汞8min+2%次氯酸钠10min消毒处理,研究结果表明未木质化茎段外植体培养污染率最低但褐化率最高,完全木质化茎段外植体培养污染率最高而褐化率最低,半木质化茎段外植体培养成活率最高,达43.48%。巴戟天茎段外植体以半木质化的材料为佳。3.巴戟天优良材料的组培快繁。本研究从巴戟天无菌体系的建立、不定芽诱导、继代培养、壮苗、生根诱导、炼苗移栽等方面对巴戟天优良材料进行了研究。(1)将巴戟天优良材料的半木质化茎段采用0.1%升汞8min+2%次氯酸钠10min的消毒方法进行消毒处理,之后接入改良MS培养基中,以建立起巴戟天优良材料的无菌体系。15d后成活率为42.1%,成活率高。(2)在6-BA的浓度分别为0.5mg/L、1.0mg/L和2.0mg/L,IBA的浓度分别为0.025mg/L、0.05mg/L和0.1mg/L,培养基类型为改良MS的正交设计的巴戟天不定芽诱导实验中,当6-BA浓度为1.0mg/L,IBA浓度为0.05mg/L时,出芽率79.49%,芽体粗壮,长势较好,为不定芽诱导的最适培养基。(3)在6-BA浓度分别为0.5mg/L、1.0mg/L和2.0mg/L,IBA浓度分别为0.1mg/L、0.2mg/L和0.5mg/L,NAA浓度分别为0.1mg/L、0.2mg/L和1.0mg/L,培养基类型为改良MS的正交设计的巴戟天增殖培养实验中,添加6-BA1.0mg/L+IBA0.1mg/L+NAA0.2mg/L增殖系数最高,达到7.21,且苗中等粗壮长势良好,是不定芽增殖的最佳培养基。(4)在6-BA浓度分别为0.4 mg/L、0.8 mg/L、1.0 mg/L,IBA浓度分别为0mg/L、0.1mg/L和0.2mg/L,NAA浓度分别为0mg/L、0.2mg/L和0.4mg/L,培养基类型为改良MS的正交设计的巴戟天壮苗实验中,添加6-BA0.4mg/L+IBA0mg/L+NAA0mg/L,组培苗平均长高1.988cm,苗颜色深绿,茎秆粗壮,是巴戟天壮苗的最佳培养基。(5)在IBA浓度分别为0mg/L、0.2mg/L和0.8mg/L,NAA浓度分别为0mg/L、0.2mg/L和0.8mg/L,培养基类型分别为1/2MS、MS和2MS的改良培养基的正交设计的巴戟天生根诱导实验中,不添加激素的1/2MS培养基生根率100%,且均为正常根,根须多,生根早,为最佳生根诱导培养基。(6)炼苗7天后,开始巴戟天移栽基质的初步选择,实验证明以黄心土:沙=1:1为佳,其成活率达85.71%。