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该文包括锯缘青蟹Sox基因HMG-box的克隆和表达两个部分.在第一部分中,参照人SRY基因HMG-box保守区的序列设计一对兼并引物,采用PCR技术以雌、雄锯缘青蟹基因组DNA为模板进行PCR扩增,结果雌、雄个体均扩增出一条约216bp的目的片段,与阳性对照人SRY基因HMG-box保守区扩增片段大小一致,初步说明雌、雄锯缘青蟹个体中均存在SRY基因的同源基因Sox.然后将PCR扩增产物克隆到pGEM-T载体上,辅以PCR-SSCP分析技术筛选阳性克隆.最后挑取10个阳性克隆(4个来自雌蟹,6个来自雄蟹)测序,经Blast搜索表明,雌性锯缘青蟹的4个阳性克隆得到两种不同序列:序列Ⅰ和序列Ⅱ,二者的比例为1:3,序列Ⅰ和序列Ⅱ片段长度均为213bp,编码71个氨基酸.雄性锯缘青蟹的6个阳性克隆只得到一种序列,与雌性锯缘青蟹序列Ⅱ一致,为同一个Sox基因.Clustal W分析显示,序列Ⅰ与序列Ⅱ之间核苷酸同源性为69%,氨基酸同源性为70%.依Sox基因家族7大亚族的划分,序列Ⅰ为Sox-B亚族成员之一,序列Ⅱ是Sox-C亚族成员之一.锯缘青蟹雌、雄个体间Sox基因成员的差异,暗示Sox基因在锯缘青蟹中可能有性别差异.在该论文的第二部分中,通过以锯缘青蟹18S rRNA为内标的半定量RT-PCR,研究性成熟雌、雄锯缘青蟹的性腺、肌肉、心脏和中肠腺四种组织Sox基因的表达.结果显示,Sox基因在雌性的卵巢、肌肉组织、心脏和雄性的中肠腺中表达量较低,而在雄性的精巢中表达量较高,在雌性的中肠腺、雄性的肌肉组织和心脏没有表达.表明Sox基因在锯缘青蟹雌雄个体中的表达存在组织特异性和性别特异性.该研究为探索锯缘青蟹的性别决定机制以及Sox基因的进化等提供了分子资料.