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目的细胞因子组合干细胞因子（SCF）+FLT3配体（FL）+血小板生成素（TPO）是体外培养脐血干细胞最基础的组合，白细胞介素-3(IL-3)有诱导脐血干细胞分化的功能。体外扩增脐血造血干细胞是目前研究的热点，对扩增后细胞的归巢能力改变研究报道较少。本文主要研究在两种不同细胞因子组合的体外培养后,比较脐血CD34~+细胞增殖、归巢、分化能力的改变。方法收集健康足月产新生儿脐血，使用Ficoll淋巴细胞分离液分离单个核细胞，将免疫磁珠分选纯化的脐血CD34~+细胞分别在细胞因子组合为A:SCF+FL+TPO、B: SCF+FL+TPO+IL-3支持的无血清、无基质的液体培养基中扩增培养14天。收集扩增前、扩增后14d的有核细胞进行检测分析，计数总集落形成单位（CFC），分析细胞的增殖情况，通过流式细胞术检测在不同细胞因子组合体外培养后，脐血CD34~+细胞表面分化指标（CD33，CD41，CD71）以及归巢相关分子（CLA，CD11a，CD18，CD26，CD44，CD62L，CD162，CD184）的变化。结果1.CD34~+细胞的扩增情况：体外培养14后，A组和B组有核细胞（TNC）扩增的倍数分别为（206.40±32.05、340.00±82.45）倍，含IL-3组的扩增倍数高（P=0.01）；CD34~+细胞扩增的倍数分别为（27.78±4.15、21.56±6.09）倍，不含IL-3组的扩增倍数稍高，但两组差异无统计学意义（P=0.096）；两组总的集落形成单位(CFC)扩增倍数分别为（77.86±5.96、107.16±13.06）倍，含IL-3组的扩增倍数高（P=0.005）；2.体外培养后两组CD34~+细胞的分化相关分子的改变体外培养后，两组CD34~+细胞均发生分化，与扩增前相比，均有统计学差异。含细胞因子IL-3的B组细胞CD33，CD41表达较A组增强，P值分别为0.001、0.004，但CD71表达较A组减弱（P=0.002）,差异均有统计学意义。3.体外培养后两组CD34~+细胞的归巢能力变化脐血CD34~+细胞分选富集的纯度为（98.36±0.62）％。扩增后A组和B组归巢粘附分子CD11a，CD18阳性率均较培养前升高（P值均＜0.05），且含细胞因子IL-3的B组表达较高（P=0.017），两组之间有统计学差异。归巢中与趋化因子有关的CD184，CD26表达经扩增后两组均升高（P值均＜0.05），但两组之间无统计学差异。与归巢有关的选择素配体CD62L,含IL-3的B组较扩增前降低（P=0.01）,A组较扩增前无统计学差异（0.068），两组之间无统计学差异（P=0.269）。CD162表达显示A组较扩增前降低（P=0.004），较B组增加（P=0.041）,B组与扩增前无统计学差异（P=0.109）。两组细胞扩增后CLA均较前表达升高（P值均＜0.05）,且含细胞因子IL-3的B组较A组高（P=0.013），差异有统计学意义。归巢相关的透明质酸受体CD44表达两组均较前均减少（P值均＜0.05），在一定程度上降低了细胞的归巢能力，但两组之间差异无统计学差异。结论1.两组细胞因子组合体外培养均使脐血CD34~+细胞获得扩增和分化；2.细胞因子组合：SCF+FL+TPO+IL-3比不含IL-3时扩增效果佳，且诱导细胞早期向髓系和巨核系分化的能力强；3.两组细胞因子组合体外培养后其CD34~+细胞表面归巢相关分子的表达变化较扩增前趋势均不统一，在增强归巢能力的同时也有对归巢不利的影响；含IL-3的B组细胞因子组合在增强细胞扩增效果和分化的同时，其归巢能力较A组有增强的趋势。