鼎湖鳞伞菌(Pholiota dinguensisis Bi)是Pholiota属中的一个新种,1985年发现于我国广东省,为中国特有种。现代医学研究表明,真菌多糖具有免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、降胆固醇、降血糖、抗菌和抗病毒、抗过敏和抗炎、保肝护肝和肠道益生等功能。目前,对鼎湖鳞伞菌的研究主要侧重于菌丝体多糖的发酵条件优化、分离纯化和抗肿瘤活性等方面,而关于鼎湖鳞伞菌胞外多糖的研究尚未见报道。因此,本论文旨在对鼎湖鳞伞菌胞外多糖的分离纯化、理化性质、结构及其抗氧化活性进行研究。主要研究结果如下:1鼎湖鳞伞菌胞外多糖的分离纯化与理化性质在28℃、120 rpm,接种量为15%的发酵条件下,鼎湖鳞伞菌胞外多糖产量为930 mg/L。利用DEAE凝胶阴离子交换柱色谱法对鼎湖鳞伞菌胞外粗多糖进行初步分离,各个组分分别采用SephadexG-100凝胶过滤柱色谱法进一步纯化,得到PDP-1、PDP-2和PDP-3三个组分。采用苯酚-硫酸法、间羟联苯法、考马斯亮蓝法和氯化钡-明胶比色法测定了多糖样品中的总糖、糖醛酸、蛋白质和硫酸基含量。结果表明鼎湖鳞伞菌胞外粗多糖、PDP-1、PDP-2和PDP-3中,总糖量分别为66.93%、63.20%、68.95%和37.81%;糖醛酸含量分别为0.61%、0.58%、0.94%和1.00%;蛋白质含量为0.88%、0.01%、0.24%和 3.01%;硫酸基含量为 4.67%、10.45%、2.98%和 12.11%。在各多糖组分中,PDP-3含有较高的蛋白质、糖醛酸和硫酸基含量。通过体外模拟胃肠道消化研究了鼎湖鳞伞菌胞外多糖在肠胃液消化过程中的稳定性。结果表明PDP-1在人工胃液6h后开始被消化分解,PDP-2和PDP-3在胃液中较稳定,在肠液中4 h开始分解。利用ARSE流变仪研究了鼎湖鳞伞菌胞外多糖的静态流变学性质。结果表明其表观粘度随着浓度增大而增大;温度对其表观粘度影响不大;酸性条件下其表观粘度高于碱性条件;NaCl和CaCl2能增加鼎湖鳞伞菌胞外多糖的表观粘度,特别是CaCl2对多糖表观粘度有较大促进作用;蔗糖能显著提高鼎湖鳞伞菌胞外多糖表观粘度。2鼎湖鳞伞菌胞外多糖的结构采用HPGPC法分析鼎湖鳞伞菌胞外多糖三个纯化组分的纯度与相对分子量。发现PDP-1和PDP-2组分的色谱图表现为单一峰,峰形对称,说明这两个组分都是均一组分,纯度较高;PDP-3组分峰形不完全对称。PDP-1、PDP-2和PDP-3的分子量为2.67× 104、1.25× 106 和 1.39×106Da。鼎湖鳞伞菌胞外多糖的PDP-1组分含有甘露糖、核糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和岩藻糖,摩尔比为5.58:0.46:0.13:2.50:0.81:0.65:16.06;PDP-2组分含有甘露糖、核糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、岩藻糖,摩尔比为5.90:0.44:0.14:2.16:0.42:13.29;PDP-3组分有甘露糖、核糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、岩藻糖,摩尔比为69.92:3.66:1.60:3.81:18.47。由此可见,PDP-1中含有半乳糖,而在PDP-2和PDP-3中没有检测到;PDP-3中含有葡萄糖醛酸,而PDP-1和PDP-2没有检测到。红外光谱扫描结果显示鼎湖鳞伞菌胞外粗多糖及其各纯化组分均具有多糖特征峰,图谱中的吸收峰表明PDP-2和PDP-3均是酸性多糖,且PDP-3可能是一种多糖和蛋白质或肽的复合物。紫外光谱扫描结果表明鼎湖鳞伞菌菌丝体粗多糖及其各纯化组分均含有一定的蛋白质或者肽,PDP-3在280nm处的吸收峰更为明显,表明PDP-3的蛋白质比其它组分含量更高。3鼎湖鳞伞菌胞外多糖的抗氧化活性通过测定鼎湖鳞伞菌胞外多糖清除1,1-二苯基-2-苦肼基自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基能力、金属离子螯合能力和铁离子还原能力,评价了鼎湖鳞伞菌胞外粗多糖及其纯化组分(PDP-1、PDP-2和PDP-3)的体外抗氧化活性。结果表明:PDP-3在大多数抗氧化评价体系中比其它鼎湖鳞伞菌胞外多糖具有更强的抗氧化活性,可能与其较高的分子量,较高的糖醛酸含量以及较为复杂的结构组成有关。