芋螺毒素（Conotoxin，CTX）是一类由热带海洋肉食性软体动物芋螺（Conus）分泌出来的，由8～41个氨基酸残基组成的小分子多肽，富含二硫键。芋螺毒素的化学结构新颖，生物活性强，作用靶位选择性高，已成为药理学和神经科学的有力工具和药物开发的新来源，是全世界海洋药物研究的热点之一。已经成功研究的芋螺毒素大多属于A—超家族，O—超家族和M—超家族等，如MVIIA，SO3等。而对T—超家族芋螺毒素的研究，则鲜见报道。T—超家族芋螺毒素作为芋螺毒素资源的一大成员，广泛存在于各种芋螺中，具有巨大的药物开发和研究潜力。 本研究从海南产的织锦芋螺（C．textile）毒管中提取总RNA后，再反转录为cDNA，以之为模板，利用RT—PCR法分离克隆到一个新型T—超家族芋螺毒素的cDNA，全长389bp，命名为TeA31N：该cDNA编码的毒素肽前体命名为TeA31P，已在GenBank中登录，序列号为DQ141136。根据TEA31 N的核苷酸序列，推测出其前体序列TeA31P由61氨基酸残基组成：MPCLPVFVILLLL IASVPSDAQL KTKDDMPLPSFNGN ARRTPRMLSNKRICCYPNVWCCD。该序列包括芋螺毒素前体典型的三个区域：长度为24个氨基酸的信号肽（上述序列中的灰色背景部分）；长度为26个氨基酸的前肽，以及长度为11个氨基酸的成熟肽。在前肽与成熟肽之间带有标准的蛋白酶水解位点（—XKR），据此推测出其成熟肽TeA31序列为：ICCYPNVWCCD（11AA）。 本实验用ABI公司433A型全自动多肽合成仪进行固相人工合成，并用Fmoc法成功合成了TeA31线性肽，经HPLC分离与质谱鉴定，TEA31的实际分子量为1317．42，与理论值1317．47相符。经质谱鉴定确证后的TeA31合成肽，再用HPLC进行分离纯化，获得的纯化TeA31肽在合适的条件下进行氧化折叠，折叠产物经HPLC纯化后用质谱鉴定分子量为1313．8，与氧化肽的理论分子量1313．47相符。至此，本研究从海南产织锦芋螺毒液中成功克隆到了一个新型T—超家族芋螺毒素TEA31的全长cDNA，及其人工合成肽，为后续的生物活性研究与结构鉴定提供了材料。同时，建立了一套较为完善的芋螺毒素基因克隆，人工合成与合成肽分离纯化和氧化折叠的实验技术与方法。可为新型海洋药物——海南产芋螺毒素的研究与开发提供基础。