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为进一步研究兔对尿素氮的利用能力和尿素氮在兔体内的代谢途径,也为安全有效地在兔饲粮中使用尿素提供科学依据,本论文设计了三个阶段的实验研究和应用试验。 1.15N标记尿素在兔体内消化吸收及利用机理的研究 选择3月龄体重2.5kg的雄性新西兰白兔,应用稳定同位素15N尿素示踪技术,通过兔的消化代谢试验,研究兔在三种状态下(正常食粪、切除盲肠和禁食粪)尿素氮在体内的氮平衡状况,测定其消化率和利用系数,并对在兔体内形成蛋白质沉积及其它含氮化合物形态与分配进行分析。基础日粮含粗蛋白16%,尿素添加量为1%,兔每天采食量定量120g。试验结果表明,在正常食粪兔、切除盲肠兔和禁食粪兔等三种状态下:(1)尿素氮在兔体內氮平衡值分别为98.3±12.4、93.4±0.2和38.1±1.3g/d/只,分别占食入尿素氮的18.2±1.85%、17.2±0.5%和7.2±1.8%:(2)日粮尿素氮的表现消化率和利用系数分别为87.8±1.4%、20.7±8.4%;91.4±0.2%、18.8±5.4%和85.5±6.7%、8.0±0.4%;(3)血液中标记尿素氮存在比例为90.6%、89.2%和72.2%; (4)胃和小肠內容物中标记尿素氮存在比例为70.4%、63.8%;65.0%、29.4%和9.8%、14.7%;其它组织器官(胃、小肠、盲肠、大肠、肝脏、三角肌)总平均则分别为74.1%、69.9%、66.2%;(5)15N标记尿素氮在正常食粪兔和禁食粪兔盲肠内容物中以蛋白质形式存在的分别为78.5%和64.4%。可见,尿素氮的表现消化率差异很小,说明尿素很容易分解,其真消化率可能更高。尽管试验兔体内的氮平衡均表现为正平衡,但相差很大,正常食粪兔最高,禁食粪兔最低,切除盲肠兔仅略低于正常食粪兔。兔对尿素的利用系数也有相似的情形。从兔对尿素氮的利用系数20.7%来看,兔对尿素氮有较高的的利用率,显然这归结于兔的盲肠微生物和它的食粪习性的作用。因为兔在禁食粪状态下,其尿素氮的利用率大幅下降到8.8%,仅为正常食粪兔的38.6%。切除盲肠后的兔经过一个月的术后康复后,由于兔的食粪习性恢复使得切除盲肠兔对尿素氮的利用接近正常食粪兔。兔在上述三种状态下15N标记氮以蛋白质形式存在的比例,血液中均比组织器官中高,且三种状态下组织器官之间的百分比差异较小,这与血液和组织器官中的代谢强度不同有关。消化道中以蛋白质形态存在的15N标记氮比例以盲肠内容物最高,在正常食粪兔高达78.5%,这主要是盲肠微生物代谢的结果。胃和小肠内容物中15N标记氮以蛋白质存在的比例,由兔日粮尿素氮利用机理研究及其应用于食粪行为正常食粪兔和切除盲肠兔都较高,禁食兔则很低,与食粪兔相比下降86%和77%,说明胃肠内容物中部分来自盲肠,进一步证明了盲肠微生物在兔的营养中的重要作用。 2.豚酶抑制剂对兔尿素氮利用的影响 本试验旨在通过兔的尿素急性中毒试验了解兔对尿素的耐受能力,并在不同日粮尿素水平和不同豚酶抑制剂乙酞氧肪酸(acctohydrox田nic acid,AHA)水平条件下研究它们对兔血液生化指标、盲肠代谢指标和对兔生长的影响。试验分四部分进行。 实验1巧只体重Zkg左右的雄性新西兰白兔,随机分成三组,分别一次性用尿素灌胃4.59//只,9留只和13.5创只,约占兔正常采食量的3%、6%和9%。高剂量组兔均出现中毒症状,全身蜷伏发抖,并有两只试验兔死亡.中、低剂量组兔未出现临床中毒症状。灌入尿素后,兔血液中的氨氮浓度和尿素氮浓度迅速上升,l,J·时左右达到峰值,血清谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氛酶(GPT)也同时升高。中毒死亡时的兔血清氨氮和尿素氮的值分别为21.4mg几和IO82.2lmg几,GOT和GPT的值分别为28.18和70.05卡门氏单位。 实验2选用20只青年期(2.5月龄、体重1.gKg)健康新西兰兔,随机分成4组。以低蛋白(CP=l 0.12%)日粮为对照组,在此日粮基拙上分别添加1%、2%和3%尿素,组成粗蛋白含量分别为12.77%、15.22%和17.41%的n、111、W组试验组日粮。30d饲养试验结果表明,各试验组兔的日增重与对照组之间差异不显著(P>0.05),但各试验组中有随日根尿素水平升高而增加的趋势,以3%尿素组最大,平均日增重为26.0士4.69。血液生化指标分析结果显示氛氮、尿素氮浓度随兔采食后的时间的推移先逐渐上升,然后再趋平稳;对照组和试验组11、111、IV组平均氨氮浓度分别为7.22士0.43mg几、5.65土o.47mg几、7.30士o.34mg几和9.36士o.39mg几:平均尿素氮浓度分别为165.54士2.49mg几、203.54士3.09mg几、189.04士5.81mg几和207.38士8.80mg几,各组氨态氮水平基本稳定在一个正常范围内,而尿素氮水平各试验组均比对照组高,差异极显著(P<0.01);GOT和GPT平均活性试验组高于对照组。 实验3选用20只青年期(2月龄、体重约L3Kg)发育良好健康无病,未经尿素适应的新西兰雄兔,随机分为4组:I组饲喂基础日粮、n组饲喂低蛋白+3%尿素日粮、m和W组为在n组日粮基演出上加脉酶才印制剂(AHA),添加量分别为10mg服g和20mg爪g,30d饲养试验表明,各组间日增重差异不显著(P>0.05),添加豚酶抑制剂的m、W组日增重都比11组高,但比工组低。血液生化指