人类基因CXCR4、arresten的克隆、表达和arresten生物活性分析

来源 :华东师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ellenaic
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
趋化因子及其受体是肿瘤细胞生物学行为的重要调节因素。趋化因子和受体的结合激活细胞内G蛋白和磷脂酶C,通过刺激肿瘤细胞生长、趋化肿瘤细胞的定向迁移、增加肿瘤细胞的抗逆性和与胞外基质的黏附性等直接或间接作用促进肿瘤的生长和转移。 人趋化因子受体CXCR4在肿瘤细胞中广泛表达,基质细胞衍生因子SDF-1是其特异性配体。SDF-1与CXCR4的相互作用与多种肿瘤的黏附、扩散、转移、入侵行为密切相关。制备CXCR4抗体对研究CXCR4的生物学功能和肿瘤治疗有重要意义。为了原核表达CXCR4并制备其抗体,将构建的pGEX-4T1-CXCR4重组质粒转化大肠杆菌E.coliBL21(DE3),诱导表达后发现,CXCR4全蛋白对大肠杆菌细胞有毒性作用,无法进行原核表达,但CXCR4主要配体结合部位N端肽段(1-42aa)在同一原核表达系统中能够高效可溶性表达。分别用亲和层析法和硫酸铵沉淀法对重组CXCR4N端肽段进行纯化,得到纯度为80%的重组CXCR4N端肽段,为下一步筛选CXCR4特异性抗体奠定了基础。 恶性肿瘤的无限制侵袭性生长和转移依赖于血管生成(angiogenesis),许多研究表明,抑制血管生成能有效抑制肿瘤细胞的增殖和迁移。因此,抗血管生成有望成为一种新型的肿瘤疗法。 arresten是新发现的一种强有效的血管生成抑制因子,是Ⅳ型胶原蛋白a1链的羧基末端非胶原区-1多肽片段,研究发现arresten能有效抑制新生血管形成及肿瘤的生长和转移。为进一步研究arresten的生物学功能,在E.coliBL21(DE3)中原核表达重组arresten。结果显示重组arresten大部分形成包涵体。将纯化后的可溶性重组arresten作用于鸡胚绒毛尿囊膜,发现可溶性重组arresten蛋白纯化液有一定的血管生长抑制作用。
其他文献
电力载波通信是指通过载波调制技术在电力线上传输数据的技术,其最大优点是不需重新铺设通信线路,施工成本低,安装维护简单方便,因此在当前很多电力系统中有着广泛应用。但是,电力
植物非根组织(如茎、叶等)形成的根称为不定根。不定根的发生反映了植物的再生能力,也是植物扦插繁育的重要环节,插穗生根难及生根量少是影响无性系林业生产中林木繁育速度和
研究目的 心肌缺血再灌注损伤(Ischemia reperfusion injury,IRI)是指短时间内,心肌血供中断一定时间后恢复血液供应,原缺血心肌发生较血液供应恢复前更严重的损伤。在临床上
[目的] 研究神经干细胞移植到成年大鼠纹状体后,在宿主脑内的存活、迁移、分化等行为,为脑内细胞移植提供基础实验证据;探讨神经干细胞移植对PD模型动物的治疗改善情况。
本文通过对荣华二采区10
期刊
癫痫是由许多因素引起的慢性大脑功能紊乱综合征,以大脑神经元超同步放电为特征,并具有阵发性、紧急性和临时脑功能障碍的特性。据不完全统计结果显示,全球约有0.5%-2%的人正
目的:本研究采用mRNA差异显示反转录聚合酶链式反应技术(DDRT-PCR)显示NSEE诱发的NIH小鼠前胃癌癌变不同时期的差异表达序列标签(expresssequencetags,ESTs),探索前胃癌发生和发
本试验采用石蜡永久切片和光学显微摄影技术,研究四种不同株型大豆的根、茎、叶片、叶柄、花及荚果的解剖结构特征,从结构植物学方面系统地研究杂交亲本与子代的结构演化关系