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本实验将苜蓿花叶病毒（Alfalfa mosaic virus，AlMV）复制酶P2亚基基因全长cDNA序列及3′端非编码区序列构建到植物双元表达载体pROKⅡ中，分别得到重组表达载体pROKAMVF、pROKAMV3N。在实验室前期工作中已将AlMV复制酶基因的5′端1／2cDNA序列、3′端1／2 cDNA序列分别构建到植物双元表达载体pROKⅡ中，得到重组植物表达载体pROKAMV5、pROKAMV3。 将上述四种重组表达载体经农杆菌LBA4404介导转化烟草，获得相应的转化植株，进行PCR检测，结果证明目的基因已整合到烟草基因组中。pROKAMV5转化烟草获得24个转基因株系共90株植株；pROKAMV3转化烟草获得18个转基因株系共69株植株；pROKAMVF转化烟草获得4株转基因植株；pROKAMV3N转化烟草获3株转基因植株。 AlMV接种后检测抗病性结果为：pROKAMV5转基因植株中10个株系对AlMV接种表现完全抗性，pROKAMV3转化植株中12个株系对AlMV接种表现完全抗性。研究结果表明转AlMV复制酶基因不同片断的转基因植株对AlMV的侵染具有抗性，但3′端1／2 cDNA片断介导的抗病性优于5′端1／2cDNA片断。