氨气是肉鸡养殖环境中对肉鸡健康危害最大的气体污染物,对肉鸡生长和健康造成不可忽视的影响。本试验利用呼吸控制舱研究了不同氨气浓度对肉鸡行为、生产性能、肺组织形态、炎性细胞因子和神经肽的影响以及高浓度氨气对肉鸡肺组织菌群、NLRP3炎症小体以及诱导肺损伤的菌群-炎症途径的研究,旨在为畜禽舍内环境的调控和改善提供理论基础。本论文主要从氨气危害和影响途径2个方面进行研究,主要内容如下:一、不同浓度氨气对肉鸡行为、生产性能、肺组织形态和细胞因子表达的影响试验采用单因子设计,选取15日龄、体重相近的爱拔益加(AA)肉公鸡264只转入呼吸控制舱,随机分为4组,每组6个重复,每个重复11只鸡。适应7 d,温湿度为28°C、60%。从22日龄开始试验,向各个试验组通入不同浓度的氨气,分别为:对照组(0 ppm)、15 ppm氨气组、25 ppm氨气组和35 ppm氨气组,正式试验期21 d。分别于试验第7、21 d进行屠宰,测定肉鸡生产性能,观察肉鸡行为活动以及取肉鸡肺组织观察其形态学,取血清和肺组织测定炎性细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)和神经递质去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)的含量等指标。结果表明:1)7 d氨气暴露时,25 ppm时仅显著增加了饲料转化率,35 ppm才显著降低日增重和日采食量。而21 d全期试验中,25 ppm时仅显著降低日增重,35 ppm氨气时才显著降低日采食量、增加料重比。2)与对照组相比15 ppm氨气暴露下,肉鸡挠头行为即出现显著增加。3)肺组织形态观察发现,15 ppm氨气暴露下即会产生红细胞渗出、炎性细胞浸润等现象,当氨气浓度达到35 ppm时还会出现局部小叶组织增生的现象。4)炎性细胞因子检测发现,7 d氨气暴露时,25 ppm组肺组织和血清中IL-1β显著增加,35 ppm组血清中IL-10显著增加。而21 d氨气暴露时,15 ppm组肺组织IL-10即显著增加,而肺组织中IL-1β、IL-6仅在35 ppm组出现显著增加现象。5)神经肽检测发现,35 ppm氨气暴露下肺组织中5-HT含量显著降低。综上所述,15 ppm的低氨气浓度下即会对肉鸡产生负面影响,且随着氨气浓度升高,这种危害随之加重。二、高氨暴露影响肉鸡肺损伤的菌群-免疫炎性途径研究试验采用单因子设计,选取15日龄、体重相近的爱拔益加(AA)肉公鸡132只转入呼吸控制舱,随机分为2组,每组6个重复,每个重复11只鸡。适应7d,温湿度为28°C、60%。从22日龄开始试验,试验分为对照组和氨气组,向氨气组通入35 ppm浓度的氨气,正式试验期21 d。分别于试验第7、21 d进行屠宰,每个重复选择3只接近平均体重的肉鸡,屠宰后测定肉鸡呼吸道菌群、炎症损伤途径NLRP3炎症体等指标,通过呼吸道菌群、NLRP3炎症体与炎症因子的关系,研究高氨对呼吸道疾病的影响。结果发现,氨暴露7 d后,肺组织中变形杆菌门和埃希氏/志贺氏菌属所占比例显著增加,NLRP3和caspase-1mRNA表达水平显著升高,肺组织和血清中IL-1β含量均高于对照组。综上所述,35 ppm氨气通过增加大肠杆菌/志贺氏菌的比例,激活NLRP3炎症小体,促进IL-1β的释放而引起肺组织炎症。综合试验一、二得出结论:1)甩头行为能早期敏感反应氨气暴露致使肉鸡肺损伤和生产性能变化的程度;2)15 ppm氨气即导致肉鸡肺损伤、甩头行为显著增加;25 ppm氨气导致肉鸡IL-1β和IL-6含量显著增加;35 ppm氨气导致生产性能显著下降;3)35 ppm高氨气浓度暴露显著增加3-6周龄肉鸡肺组织大肠杆菌/志贺氏菌的比例,其通过菌群-NLRP3炎症途径导致大量炎症因子的释放,最终导致肺组织出现炎症损伤。