葡萄霜霉病菌与寄主品种相关的遗传分化研究

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引起葡萄霜霉病发生的病原菌——葡萄单轴霜霉[Plasmopara viticola(Berk.dt Curt)Berl.Et de Toni]是一种专性寄生卵菌,可以侵染葡萄的叶片、嫩梢、幼果等绿色组织,造成果实品质降低、产量下降、树势衰弱等不良影响,是我国乃至世界葡萄生产上的一个重要限制因子。本项研究以两个葡萄品种组成、种植历史和生态类型明显不同的生态区河北昌黎县及广西资源县的不同品种来源霜霉病菌为研究对象,通过建立霜霉病菌室内快速纯化、扩繁体系获得纯系菌株,综合田间病害流行动态监测、孢子囊形态观测、致病力测定及简单重复序列多态性分析等手段,分析葡萄霜霉病菌群体的遗传分化及重组状况,探寻病原菌与寄主间的关系,丰富遗传分化数据库,为抗病性鉴定、指导品种布局及该病害的预报防治提供理论依据。研究结果如下:1.葡萄霜霉病田间病害流行监测2014年、2015年对河北昌黎和广西资源地区在病害流行期分别调查一次病情指数。结果显示:同一地区不同寄主品种间病情指数存在显著差异,且广西‘红地球’病情指数显著高于其他品种,两年调查结果一致,说明葡萄霜霉病菌群体可能存在一定程度分化,并显示与寄主品种间存在协同进化现象;不同地区同一寄主品种病情指数差异显著性不稳定,2014年所有品种均表现为差异显著,而2015年除‘金手指’、‘火焰无核’和‘红地球’外其他品种均未表现显著差异,这可能与不同年份气候及调查时间的选取有关,具体原因有待于进一步试验进行验证。2.葡萄霜霉病菌孢子囊形态学多样性测定对广西18个和河北16个发病品种的病原菌进行孢子囊大小测定,统计结果表明:同一地区不同品种来源霜霉病菌孢子囊大小存在显著差异;不同地区同一品种来源孢子囊大小比较发现‘红宝石无核’、‘金手指’来源病原菌孢子囊长度无显著差异,宽度差异显著;‘阳光玫瑰’来源病原菌孢子囊长、宽均无显著差异;其他来源病原菌孢子囊在长度和宽度上均存在显著差异。该研究表明不同地区、寄主来源霜霉病菌群体在孢子囊形态上存在一定程度的分化。3.葡萄霜霉病菌致病力分析收集不同寄主来源的霜霉病菌,利用离体叶盘接种法测定其致病力。结果表明:不同地区同一寄主来源病原菌致病力不同,且广西地区菌株间差异性比河北地区更明显,说明两个地区病原菌群体存在差异。在两个地区内,同一地区不同寄主来源霜霉病菌群体间及不同菌株间致病力也存在显著差异,说明不同寄主来源病原菌致病力存在一定程度分化。4.葡萄霜霉病菌在分子水平上的遗传多样性分析利用8对SSR引物对广西资源、河北昌黎两地751个霜霉病菌菌株进行简单重复序列多态性分析。供试霜霉病菌明显划分为A、B两个群体,群体间差异显著,且两地病原菌主体都是群体A,群体内变异是遗传变异的主要来源。共检测到30个等位基因,期望杂合度He为0.21~0.74,Shannon多样性信息指数I为0.38~1.36,遗传分化系数Fst=0.344,且达到显著水平。结果表明:供试葡萄霜霉病菌群体遗传多样性丰富,且群体的划分与该地区的栽植品种群具有明显相关性。
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