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乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,据资料统计,发病率占全身各种恶性肿瘤的7%-10%,在妇女仅次于子宫癌。它的发病常与遗传有关,以及40-60岁之间,绝经期前后的妇女发病率较高。一般来说,早期乳腺癌癌肿较小,未发生扩散转移,通过手术切除或放射治疗的患者5年内生存率可达60%以上;但对于中晚期患者通常无法进行手术切除,临床上主要采用放化疗、中医药治疗及一些生物疗法,但随着化疗时间的延长,肿瘤细胞对化疗药物的多药耐药性(multidrug resisitance,MDR)成为治疗的最大障碍之一。MDR的发生机制复杂,迄今为止尚无逆转策略能完全克服MDR。迄今为止发现一些与肿瘤耐药相关的蛋白,如P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP1)和乳腺癌抗性蛋白(BCRP),他们的高表达与乳腺癌化疗敏感性有密切关系。自从Tsuruo等首次报道维拉帕米(verapamil)能逆转P-388/VCR细胞对长春新碱的耐药性以来,对肿瘤细胞的MDR现像研究进展非常迅速。但是化学逆转药物存在明显的毒副作用,患者耐受性较差。近年来也有大量生物制品或天然中药用于肿瘤细胞的MDR逆转,但是疗效不甚确切,应用于临床的更是寥寥无几。脉冲磁场(pulsed magnetic fields,PMF)作为一种物理方法逆转肿瘤MDR,初步研究显示具有一定潜力。本文以乳腺癌细胞系MCF-7为研究对象,研究脉冲磁场对多药耐药肿瘤细胞MCF-7/ADR的MDR逆转作用及机制。本论文包括两个实验部分:1脉冲磁场对乳腺癌细胞MCV-7/ADR多药耐药逆转的效应研究。2脉冲磁场逆转乳腺癌细胞MCF-7/ADR多药耐药机理研究。目的:研究脉冲磁场(Pulsed Magnetic Fields,PMF)对乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADR的逆转作用。方法:采用MTT实验方法,分别检测不同频率及不同磁场强度条件照射下的MCF-7/ADR细胞的耐药倍数和逆转倍数。用流式细胞术检测经脉冲磁场照射后MCF-7/ADR细胞中Rh123药物蓄积量变化。用流式免疫荧光技术检测膜经脉冲磁场照射后MCF-7/ADR细胞膜表面P-糖蛋白(P-gp)和多药耐药相关蛋白(mrp1)表达情况。采用半定量RT-PCR(逆转录-聚合酶链反应)检测经脉冲磁场照射后MCF-7/ADR细胞中MDR1和MRP1基因表达情况。建立人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADR裸鼠移植瘤模型,通过测量肿瘤体积及重量观察PMF对肿瘤细胞的体内逆转作用。结果:脉冲磁场能有效逆转乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADR对阿霉素产生的耐药性(p＜0.01),其中110Hz,40mT照射条件逆转效果最好,可达5倍左右:脉冲磁衬芴岣呗薜っ?23在细胞内的蓄积量,其中110Hz,40mT照射条件下可有效提升20%左右药物蓄积量;细胞经脉冲磁场照射后,膜表面耐药蛋白P糖蛋白表达量明显下降,MRP1蛋白表达量变化不明显;编码上述两种耐药蛋白的耐药基因表达量均明显下降;此外,脉冲磁场联合阿霉素可有效逆转裸鼠移植瘤的生长增值(p＜0.01)。结论:PMF具有逆转体外和体内乳腺癌细胞多药耐药性的作用。