随着科技水平的日益提高,使用农药已成为保障农业生产不可缺少的环节。农药通过对有害生物的防治和提高农副产品的产量、质量来改善人们的生活。目前,我国已经成为世界上第二大农药使用国,年消耗量估计在30万吨以上。近年来,由于有害生物抗药性的增强,使用农药的浓度和次数不断增加,导致有害物质大量残留在环境中,并通过食物链扩大污染,影响环境生态平衡。农药在人体内的积累和富集,能够引发各种疾病,直接影响到人类的健康。由农药残留引发的问题已经引起人们的高度重视。因此,建立一套简便、快速、灵敏的检测方法势在必行。目前,苄嘧磺隆(BSM)是农民使用最多的一种稻田除草剂。但是,长期大量地使用势必会导致该除草剂在环境中产生残留,危害整个生态系统的安全。因此对该除草剂进行实时监测是很有必要的。目前,检测苄嘧磺隆残留量的方法为传统的色谱法。虽然,色谱法较灵敏、准确,但是这种方法耗时长、检测程序繁琐、费用较高。而免疫学方法中的ELISA技术(酶联免疫吸附测定技术)却弥补了色谱法的缺点,它不但简便、快速、灵敏,而且可以大批量地检测样本。因此,该技术越来越多地被用于检测环境中的农药残留量。在本研究中,选择戊二醛作为偶联剂制备了苄嘧磺隆人工交联抗原BSM-OVA,经不同的方法鉴定抗原制备成功后,免疫BALB/c小鼠。第五次免疫后7天,测定小鼠的血清效价达到了1：1.28×105,IC50值为0.032μg·mL-1。采用PEG介导法将免疫后小鼠的脾脏细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合。经过筛选,得到一株苄嘧磺隆单克隆抗体阳性杂交瘤细胞株,编号为2H1,分泌的抗体类型为IgG2b。采用体内诱生腹水法和辛酸—饱和硫酸铵法大量制备并纯化了苄嘧磺隆单克隆抗体。采用间接竞争ELISA方法测定了抗体的最佳工作条件,建立了利用单克隆抗体检测苄嘧磺隆残留量的间接竞争ELISA方法,制作了检测该除草剂的间接竞争ELISA标准曲线,得到回归方程y=13.816x+34.753,检测范围为1～1883ng-mL-1,最低检测限0.2ng·mL-1。苄嘧磺隆以浓度10-1～103ng·mL-1在东湖水样中添加,测得回收率为96.53%～107.2%,变异系数(CV)为3.711%-8.637%,数据表明该方法具有较高的精确度和灵敏度。利用该方法检测了某些粮谷类农作物样本中苄嘧磺隆的农药残留量,发现了部分样本中存在该除草剂的残留。本研究探索了一条利用免疫学方法检测苄嘧磺隆残留量的新途径,且与传统方法相比最大的特点快速、灵敏、可批量检测样本,在环境实时监测方面具有较大的应用价值,从而为人民健康提供一定的保障。