论文部分内容阅读
为了研究雌激素在骨质疏松中的作用,进行以下实验。方法:切除小鼠双侧卵巢制作骨质疏松模型,卵巢假手术作为对照组。进行以下三项研究:(1)观察与破骨细胞和成骨细胞有关的造血指标变化,探讨卵巢切除小鼠造血系统的改变与骨质疏松的关系;(2)从小鼠脾干细胞诱导培养破骨细胞并进行鉴定;(3)通过差异显示分析方法,鉴别去卵巢小鼠与正常小鼠破骨细胞的基因表达差异,寻找骨质疏松相关基因。结果:(1)卵巢切除小鼠的CFU-GM和CFU-F明显升高,即切除卵巢后,破骨细胞和成骨细胞的前体细胞均增多,与绝经后骨代谢转换增强、破骨细胞和成骨细胞的功能活动增强相一致。(2)诱导形成较大数量的多核破骨细胞经抗酒石酸-酸性磷酸酶(TRAP)染色呈阳性,可在骨片上形成骨吸收陷窝,与125I标记的鲑鱼降钙素结合表明,破骨细胞上存在降钙素受体,而且数目相对恒定。为开展破骨细胞的作用和影响因素的研究工作提供了保证。(3)分离出四条EST表达片段,与NCBI上Genebank的小鼠基因数据库比对,发现,它们与C57BL/6J小鼠基因组中部分基因具有高度同源性。其中一条是完整的基因,比对正确率为75%,名为Pira6,长度为11726个碱基。该基因存在于未切除卵巢的小鼠脾干细胞诱导出的破骨细胞,而去卵巢小鼠破骨细胞缺失,基因片断位于13号染色体。