【摘 要】
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甘蓝型油菜作为最重要的油料作物之一,提高油菜的产油量非常重要。模式植物拟南芥与甘蓝型油菜同为十字花科植物,序列分析亲缘性相近,可以利用拟南芥相关基因来研究油菜产油机制,并寻找潜在的遗传转化位点。植物油脂主要以油体蛋白的形式储存于种子中。拟南芥中油体蛋白(oleosin)影响种子发育及油脂含量。SNARE(soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor attac
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甘蓝型油菜作为最重要的油料作物之一,提高油菜的产油量非常重要。模式植物拟南芥与甘蓝型油菜同为十字花科植物,序列分析亲缘性相近,可以利用拟南芥相关基因来研究油菜产油机制,并寻找潜在的遗传转化位点。植物油脂主要以油体蛋白的形式储存于种子中。拟南芥中油体蛋白(oleosin)影响种子发育及油脂含量。SNARE(soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor attachment protein receptor)蛋白通过介导膜融合参与细胞膜转运过程。本实验组前期研究发现SNARE蛋白如VAMP721可以与细胞质蛋白产生互作,其中很多互作蛋白在代谢过程中起到重要催化作用,提示SNARE蛋白可以通过与细胞质酶蛋白互作调控重要产物合成。是否SNARE蛋白通过与OLE互作影响油脂积累,值得研究。本实验根据文献报道,从拟南芥中扩增OLE,通过酵母基于杂交的分裂泛素化系统(the mating-based Split-Ubiquitin System,mbSUS)研究其与VAMP7家族SNARE蛋白互作情况。结果发现VAMP712,VAMP721,VAMP724及VAMP726可以与OLE4蛋白结合。由于多个SNARE蛋白都与OLE4具有互作,它们之间可能存在相互竞争。为探索这个问题,本实验基于mbSUS系统,利用Gateway重组技术多基因一步克隆法思路构建了2in1-BridgeSUS系统用于检测第三蛋白对诱饵与猎物蛋白间互作的影响。
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