萘降解菌株的分离、降解基因检测和萘污染土壤的生物修复

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萘是一种在环境中广泛存在的芳香烃污染物,是煤焦油及其产品中的一种主要成分。由于它可以较容易地被土壤中的微生物降解,所以成为研究生物降解的一种模型化合物。 本研究从纪庄子污水处理厂的活性污泥、大港油田和天津香料厂混合废水中分离出48株萘降解细菌,对它们进行了抗菌素抗性和质粒检测,并从中筛选出一株萘高效降解菌ND24,对其进行了利用碳源和氮源的种类,生长和降解特性,及最适生长条件的研究。通过ND24菌株的16SrRNA基因的PCR扩增、克隆和核苷酸序列测定,将它的核苷酸序列与GenBank其它菌株的16SrRNA基因做了同源性比较,结果表明它属于假单胞菌(Pseudomonassp)。 利用本实验室以前分离的萘高效降解菌株ND6,用PCR方法扩增得到的萘降解基因nahY、nahAc、nahG、nahU、nahH、nahF、nahV等,以及儿茶酚邻位降解途径的catA基因和龙胆酸途径的nagI基因,与此48个株菌的总DNA杂交,分析它们的萘降解基因的种类和萘降解途径的区别。结果显示,趋化基因nahY和降解基因nahH、nahU、hahV只存在于大港油田和天津香料厂混合废水中筛得的菌株中,其它基因在两种来源的菌株中都存在。龙胆酸途径基因nagI在两种来源的菌株中均不存在。杂交结果显示降解基因的种类与细菌的生存环境有一定关系。 用ND24菌株处理萘污染土壤,对其进行生物修复,结果显示试验组与对照组相比降解速度有显著提高。
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