依折麦布联合罗格列酮通过LXRα-ABCA1途径对血管平滑肌源性泡沫细胞胆固醇含量的影响

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目的:研究依折麦布联合罗格列酮对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管平滑肌源性泡沫细胞胆固醇含量的影响,探讨肝X受体α(LXRα)-三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)信号通路在其中的作用。方法:正常培养的原代大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)作为空白对照组,利用ox-LDL(50ug/ml)干预VSMCs建立平滑肌源性泡沫细胞模型,然后根据实验要求将泡沫细胞分为泡沫细胞组、不同浓度的依折麦布组(3umol/L,10umol/L,30umol/L)、罗格列酮组(25umol/L)、联合组(30umol/L依折麦布+25 umol/L罗格列酮)。油红O染色鉴定泡沫细胞模型,real-time PCR检测各组细胞LXRα和ABCA1的m RNA表达,Western blot测定各组细胞LXRα和ABCA1蛋白表达,酶荧光法检测各组细胞内总胆固醇(TC)及游离胆固醇(FC)的含量。结果:1.与空白对照组相比,泡沫细胞组LXRα和ABCA1的m RNA表达降低(P<0.05);与泡沫细胞组相比,不同浓度的依折麦布组LXRα和ABCA1的m RNA表达增加(P<0.05),且呈一定浓度依赖性(P<0.05)。2.与空白对照组相比,泡沫细胞组LXRα、ABCA1的m RNA和蛋白表达均降低(P<0.05);与泡沫细胞组相比,依折麦布30umol/L组、罗格列酮组及联合组LXRα、ABCA1的m RNA和蛋白表达增加(P<0.05),且联合组与依折麦布30umol/L组和罗格列酮组相比,LXRα、ABCA1的m RNA和蛋白表达增加更为显著(P<0.05)。3.与空白对照组相比,泡沫细胞组细胞内TC、FC和胆固醇酯(CE)的含量均增加(P<0.05),且CE/TC>50%;与泡沫细胞组相比,依折麦布30umol/L组、罗格列酮组及联合组细胞内TC、FC、CE含量均减少,CE/TC比值下降(P<0.05),且联合组与依折麦布30umol/L组和罗格列酮组相比,细胞内TC、FC、CE含量及CE/TC比值降低更为显著(P<0.05)。结论:依折麦布及罗格列酮均可以通过上调LXRα-ABCA1信号通路,促进平滑肌源性泡沫细胞中ABCA1介导的胆固醇逆转运(RCT),减少细胞内蓄积的胆固醇;且两者联合可进一步上调LXRα和ABCA1的表达,促进胆固醇外流,显著降低细胞内胆固醇的含量。
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