成釉细胞瘤是常见的发生于颌骨内的牙源性上皮来源的肿瘤，世界各地均有发病报道，发病率占所有牙源性肿瘤的11％-18％。成釉细胞瘤多为良性病变，但具有颌骨内浸润性生长和易复发的生物学特性，造成颌骨严重破坏，肿瘤的侵袭性生长特性决定了手术往往需要扩大切除颌骨组织，造成患者生活质量下降。依据临床及放射线特征和组织病理学特征，成釉细胞瘤分为实性/多囊型、单囊型、外周型和促结缔组织增生型。实型/多囊型最为常见，包括滤泡型和丛状型两大主要类型，又包括棘皮瘤亚型、颗粒细胞亚型和基底细胞型等变异类型。有研究表明，滤泡型的侵袭性和复发性稍高于其他组织学分型，而单囊型的复发性较低，常可采用保守的外科术式进行治疗。目前对于成釉细胞瘤的肿瘤形成机制和侵袭性机制尚不完全明确。　　侵袭性是指细胞通过细胞间和细胞外基质的屏障迁移至邻近组织，这一过程有多种基因及其产物的表达/激活参与。上皮间质转化(EMT)是上皮细胞丧失其极性和黏附性而具有间质细胞特性，运动迁移能力增强，抗凋亡能力增强。许多研究表明，EMT在肿瘤的发生、侵袭和转移机制中具有重要作用。多条信号通路包括TGF-beta，FGF,EGF,HGF,Wnt/beta-catenin and Notch以及氧化应激都参与EMT的发生。E-cadherin是维持上皮细胞之间相互连接，保持上皮表型的重要黏附分子，E-cadherin减少或丢失是EMT发生的关键事件。Vimentin是中间丝的一种蛋白，主要分布于间质细胞中，如出现在上皮源性肿瘤中则是EMT的表现，与细胞的生长分化状态以及细胞游走迁移有关。Wnt家族信号在胚胎发育及组织内稳态中调控细胞增殖、细胞极性，该通路异常激活会促进肿瘤发生。Beta-catenin作为Wnt通路的关键因子参与多种细胞过程包括细胞的黏附、生长、分化;同时与E-cadherin分子的胞浆内部分形成复合物参与细胞间连接，复合物结构破坏会导致细胞黏附下降，侵袭和迁移能力增高。　　端粒是真核生物染色体末端的特殊结构(TTAGGG)n，具有维持染色体结构的稳定性，防止染色体降解、重组、融合及染色体结构基因丢失的作用。端粒随着体细胞有丝分裂逐渐缩短，最终导致细胞衰老凋亡。端粒结构异常则会导致染色体末端发生融合及重组，增加基因的不稳定性。端粒酶催化端粒的合成并维持其长度。正常成人体细胞中几乎不表达端粒酶活性，在大多数恶性肿瘤细胞中都有端粒酶的表达。人端粒酶逆转录酶(hTERT)端粒酶活性的决定性因素，多种转录因子及信号通路、表观遗传学修饰参与hTERT表达的调控。有研究表明，hTERT启动子区有Wnt/β-Catenin通路的作用靶点，在肿瘤形成中发挥作用。　　目的:本实验通过研究E-cadherin、Vimentin和β-catenin在成釉细胞瘤中的表达变化初步探讨成釉细胞瘤的侵袭性生长中是否存在EMT，并对hTERT在成釉细胞瘤中的表达情况及临床相关性进行分析，初步探讨成釉细胞瘤中hTERT的甲基化调控机制。　　方法:本研究收集2004-2011年中国医科大学附属口腔医院外科手术切除的人成釉细胞瘤、鳞状细胞癌的组织标本和存档蜡块，正常口腔黏膜来自于下颌第三磨牙拔除术。肿瘤病例按照WHO(2005)头颈部肿瘤诊断标准及分类由两位以上病理医师进行诊断分型。1、利用免疫组织化学法检测临床组织标本中E-cadherin、Vimentin、β-catenin和hTERT在组织中的定位及表达情况。2、免疫印迹方法检测临床标本中E-cadherin、Vimentin、β-catenin和hTERT的表达情况。3、利用RT-PCR方法检测临床标本中hTERT mRNA的表达。4、应用亚硫酸盐修饰DNA后扩增测序法(BSP)检测hTERT基因启动子区的甲基化程度。　　结果:1、免疫组化结果显示成釉细胞瘤中E-cadherin在外周柱状或立方状上皮细胞膜表达降低或丢失，Vimentin主要在间质强阳性表达，在瘤上皮细胞也有阳性表达，E-cadherin与Vimentin的表达成负相关。同时β-catenin在上皮细胞膜表达有所下降，出现了细胞浆/细胞核异位表达。2、蛋白质免疫印迹结果表明，与正常口腔黏膜相比，E-cadherin和β-catenin在肿瘤上皮表达量有所下降，而Vimentin表达量升高。hTERT在成釉细胞瘤中表达量高于正常黏膜。3、免疫组化结果显示，hTERT在正常口腔黏膜、成釉细胞瘤、牙源性角化囊性瘤和口腔鳞癌中均有阳性表达，分别为28.6％、72.9％、75.6％、90.1％，表达情况存在显著统计学差异(P＜0.05)。成釉细胞瘤原发和复发、不同病理分型hTERT表达水平均存在显著统计学差异(P＜0.05)。4、检测了30例成釉细胞瘤标本的hTERT启动子上游调控区21个CpG位点，第5CpG位点甲基化程度最高100％(30/30)，第15位点最低为50％(15/30)。　　结论:1、E-cadherin在成釉细胞瘤上皮中的表达量降低，伴随间质标志物Vimentin表达升高，β-catenin出现异位表达，提示在成釉细胞瘤侵袭过程中存在EMT。2、hTERT在成釉细胞瘤中为阳性表达，表达量高于正常黏膜组，且随着肿瘤复发表达率升高，提示hTERT可能参与成釉细胞瘤的形成和进展。3、hTERT基因启动子上游调控区存在高度甲基化，提示在成釉细胞瘤中hTERT的激活可能是受到DNA甲基化调控。