【摘 要】
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背景与目的:帕金森病(PD)是常见的运动障碍疾病。目前无特效治疗方法。近年开展的细胞移植及基因治疗提供了最可能根治PD的方法,是PD治疗的研究热点。而选择理想的移植替代来
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背景与目的:帕金森病(PD)是常见的运动障碍疾病。目前无特效治疗方法。近年开展的细胞移植及基因治疗提供了最可能根治PD的方法,是PD治疗的研究热点。而选择理想的移植替代来源至关重要。研究发现骨髓中除造血干细胞以外还存在另外一类干细胞,被称为骨髓基质干细胞(MSCs)。MSCs具有自我更新及多向分化潜能;来源丰富、取材容易;可自体回输,不会发生免疫排斥反应;体外扩增迅速;容易转入外源基因。被视为多种组织细胞移植的替代来源和基因治疗的有效运载工具。现阶段体外培养条件下多采用各种细胞因子调控MSCs的分化方向,在体外扩增达到一定数量级后,再进行移植。研究者目前已能够在体外使MSCs转化为神经元样细胞,表达神经元特有的表面标志,但其中绝大部分诱导物的诱导转化率低,而且诱导分化的神经元样细胞不具备正常神经元的基本功能。因此如何提高诱导转化率,并使MSCs特异转化为具有正常功能的神经元是MSCs在临床应用之前必须解决的关键问题。本实验应用胶质源性神经营养因子(GDNF)和单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)等体外联合诱导MSCs向DA能神经元转化,目的是寻求体外诱导MSCs定向分化为多巴胺(DA)能神经元的最佳条件,为PD的细胞及基因治疗奠定实验基础。方法:取雄性Wistar大鼠,暴露股骨和胫骨骨髓腔,获取骨髓液。密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞。以1×105/ml的密度接种于含10
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