沙棘属植物的果实中含有丰富的黄酮类物质,近年来大量的医学研究已经证实,沙棘黄酮具有降低胆固醇、抗氧化、抗炎和抗癌、抗辐射、抗心肌缺血、抗心率失常等多种功效,沙棘黄酮产品的开发前景广阔。沙棘果实中的黄酮类化合物通常以糖苷的形式存在,经研究,黄酮苷的抗氧化活性低于所对应的苷元的抗氧化活性,而通过生物转化法可以将黄酮苷转化为苷元,提高其抗氧化活性。目前,我国对沙棘黄酮类化合物的研究主要在分离提取、生物活性及结构研究等方面,对其生物转化的研究较少。本文研究了大果沙棘中黄酮类化合物的提取工艺及其纯化方法,并用生物转化法将沙棘黄酮糖苷转化为苷元,提高其抗氧化活性,并考察了生物转化的条件对转化产物抗氧化活性的影响。目前,大果沙棘总黄酮的提取方法主要有水提法、有机溶剂提取法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法和超临界流体萃取法。本文采用溶剂法提取大果沙棘总黄酮,并在单因素试验基础上,利用响应面分析法考察乙醇的体积分数、提取温度、固液比、提取时间对总黄酮得率的影响,并对提取工艺进行优化。结果表明,最佳提取条件:提取温度为61.85℃,乙醇体积分数为71.36%,提取时间为2.59h,液固比为18.33∶1,此条件下黄酮得率为0.741%。同其它方法比较,此方法设备简单,成本低,适于工业化生产。本文选用大孔树脂为层析介质纯化沙棘总黄酮,并研究了上样液pH值、上样液流速、上样液浓度、洗脱液浓度几个因素对吸附和解析过程的影响。最佳纯化条件为:洗脱液为60%乙醇,上样液pH值为3,上样液流速为1mL/min,上样液浓度为0.96mg/mL。纯化后的黄酮用黑曲霉、绿色木霉、灰色链霉菌和总状毛霉等菌株进行生物转化,最终筛选出黑曲霉和灰色链霉菌作为转化菌株。然后分别考察了培养基初始pH值、转化温度、转化时间,底物添加量和接种量等几个因素对转化反应的影响。以黑曲霉为转化菌种时,最佳培养条件分别为:培养温度为34℃、转化时间为3天、底物添加量为6%、培养基初始pH值为5.5、接种量为9%;在此条件下大果沙棘总黄酮羟自由基清除率和总抗氧化能力分别提高12.11%和7.35U,黄酮苷元的转化率为41.17%。以灰色链霉菌为转化菌种时,最佳培养条件分别为:培养温度为31℃、转化时间为4天、底物添加量为8%时、培养基初始pH值为6.5、接种量为7%;在此条件下大果沙棘总黄酮羟自由基清除率和总抗氧化能力分别提高15.06%和9.35U,黄酮苷元转化率为48.20%。