背景:宫颈癌是最常见的女性生殖系统恶性肿瘤,发病率位居女性癌症第四位,也是导致女性癌症死亡的第四位病因。在中国,仅2015年就约有98,900例新发病患者和30,500例死亡患者。人乳头瘤病毒(HPV)感染被认为是宫颈癌发病的主要原因,宫颈癌中最常检测到的病毒类型是HPV16和HPV18。近年来由于液基薄层细胞技术和HPV检测的普及,宫颈癌患者可以被早期发现和治愈,但仍有30%-40%的早期宫颈癌患者会出现复发,具有危险因素的患者复发概率更高。因此寻找准确性、特异性判断肿瘤预后和复发的生物学指标非常重要,这些指标能够区分哪些患者预后较差,从而进行更加精确的个体化治疗。生长阻滞和DNA损伤基因(GADD45)是DNA损伤修复的关键基因。该基因家族由GADD45A、GADD45B、GADD45G共同组成。其中GADD45A基因是细胞生长阻滞和DNA损伤修复基因,它的表达受p53依赖途径和p53非依赖途径两种方式调控。GADD45A基因在调控细胞周期、凋亡、侵袭等方面起到重要作用。一些研究表明,在食管癌、脑胶质瘤、肺癌等患者中,GADD45A基因的表达异常与肿瘤的预后密切相关。因此,GADD45A基因的表达可能作为判断肿瘤患者预后的生物学标志。以铂类为基础的化疗在各个分期的宫颈癌治疗中应用广泛,化疗耐药是导致宫颈癌治疗失败的原因之一,因为化疗对于早期微小转移病灶至关重要,耐药可导致患者复发及远处转移,严重威胁患者的生存。肿瘤细胞的化疗耐药与DNA的损伤修复密切相关,GADD45A是DNA损伤修复的关键基因,在损伤因子作用下,GADD45A可随DNA损伤修复通路的诱导而表达。研究显示,在黑色素瘤、前列腺癌等细胞中,GADD45A基因表达的高低影响肿瘤细胞的化疗敏感性。因此,GADD45A基因可能成为逆转肿瘤细胞耐药、提高化疗敏感性的新靶点。综上所述,GADD45A的异常表达与肿瘤的预后和化疗敏感性有关。然而,其在宫颈癌中的临床意义及与化疗敏感性的关系仍不明确。我们将探究在宫颈癌中,GADD45A基因的表达与患者预后的关系,同时观察下调GADD45A基因的表达后,宫颈癌Hela细胞对铂类化疗药物敏感性的影响。目的:本研究分析宫颈癌患者癌组织标本中GADD45A的表达与患者预后的关系,同时利用RNA干扰技术,探讨下调GADD45A基因的表达对宫颈癌Hela细胞化疗敏感性的影响。方法:1.利用免疫组织化学法分析GADD45A在宫颈癌及癌旁组织中的表达及定位,通过Kaplan-Meier分析比较GADD45A表达模式与宫颈癌患者预后生存的关系,运用单因素和多因素Cox回归分析GADD45A基因的表达对患者预后的影响;2.通过RNA干扰技术将GADD45A si RNA转染Hela细胞,利用q RT-PCR和Western Blot检测转染宫颈癌Hela细胞后,GADD45A在m RNA和蛋白质水平表达的变化;CCK-8法检测下调GADD45A基因对Hela细胞顺铂敏感性的影响;流式细胞术检测在顺铂的作用下,下调GADD45A基因对Hela细胞凋亡和周期的影响。结果:1.GADD45A在宫颈癌组织及癌旁组织均高表达;GADD45A在宫颈癌组织中的表达包括细胞核-细胞浆共表达模式和细胞浆表达模式,相比于细胞浆表达模式的患者,细胞核-细胞浆共表达的患者无病生存期(P=0.010)和总生存期(P=0.159)更长;GADD45A表达模式是影响无病生存期的独立预后因素(P=0.037),宫颈癌组织中GADD45A的表达模式与是否行新辅助化疗相关(P=0.048);2.与Control组和NC组相比,下调GADD45A基因表达可提高宫颈癌Hela细胞的顺铂敏感性;在顺铂的作用下,下调GADD45A基因表达后,细胞凋亡率明显增加;细胞周期S期比例增加,G2/M期比例下降。结论:GADD45A在宫颈癌组织中的表达模式与患者的预后相关,其中细胞核-细胞浆共表达模式的患者预后更好;下调GADD45A可以提高宫颈癌Hela细胞对顺铂的敏感性,诱导细胞周期S期阻滞可能是其主要作用机制。