多发性硬化症(MS)是中枢神经系统的一种弥漫性慢性炎症性脱髓鞘疾病,伴有神经轴索退行性病变,其典型表现为随着复发-缓解过程,神经后遗症增加。世界范围内大约有三百万的MS患者。该病具有反复发作以及逐步恶化的特点,患者会出现运动、感觉、视觉、认知能力的持续下降、情绪抑郁,甚至引发癫痫、瘫痪,严重影响生活质量。这些症状产生的主要原因是由于神经系统的损伤,其中以髓鞘损伤为主。MS目前尚无能够治愈的药物,一线治疗药物以干扰素、醋酸格拉默等为代表。临床研究表明一线药物能够适当缓解残疾的进程,降低约30%～40%的复发率,但由于不能有效恢复髓鞘的正常功能,仍无法完全治愈。此外,由于血脑屏障的存在,药物进入脑内的量有限,而分布于体内其它部位会导致流感样综合征、注射部位皮肤反应及其他如肝肾功能的损伤等严重不良反应。因此,通过合适的递药方式将治疗药物递送至病灶区域,增效减毒,可以为MS和其他脑部疾病的治疗提供一种可行的治疗方案。目前上市的MS治疗药物大部分为消炎与免疫调节药物,且存在严重的不良反应,中药因其良好的治疗效果和较低的不良反应在MS治疗中越来越受到重视。虎杖为传统中药,“味甘,平,无毒”,被收载于中药古籍《证类本草》中。白藜芦醇为中药虎杖的主要活性成分,具有抗炎、抗氧化、抗病毒和抗癌等多种活性。近年来有研究表明白藜芦醇在治疗MS上不仅可以EAE小鼠的降低临床评分,延缓疾病的进展,更具有促进髓鞘再生的功能。但白藜芦醇溶解性差,受到BBB的限制难以入脑,限制了其进一步应用。为解决这一问题,本课题设计并构建了一种新型的靶向至脱髓鞘区域的白藜芦醇纳米递药系统:β-细辛醚、穿膜肽R8以及髓鞘少突胶质细胞糖蛋白靶向肽PPTF共修饰的载白藜芦醇纳米粒。芳香开窍引经类中药成分β-细辛醚能够促进纳米粒透过鼻腔粘膜和血脑屏障转运入脑。R8具有很强的跨膜转运能力,可促进纳米系统穿过细胞膜、紧密连接和血脑屏障进入中枢神经系统。β-细辛醚和R8联合使用,能最大程度增强纳米粒经鼻入脑的靶向性。MOG是少突胶质细胞表面最外层的膜蛋白,只存在于成熟分化的少突胶质细胞,特异性较强,被认为是MS的潜在靶点。PPTF肽作为重组MOG-ab抗体片段能与MOG特异性结合,促进纳米粒入脑后进一步向病灶区域转运。聚酯材料由于好的载药性能被用于模型药物白藜芦醇的包载。壳聚糖作为一种被FDA批准的具有良好安全性的生物材料,由于表面携带正电荷可以强烈地结合在细胞膜以及粘膜表面,有利于延长纳米粒在靶点的停留时间,并能打开紧密连接从而增加吸收。因此,本课题通过两种载体材料与三种靶向分子共同构建纳米递药系统,提高难溶性药物白藜芦醇的经鼻入脑转运效率,以进一步提高对MS的治疗效果。此外,这一靶向纳米递药系统的构建模式,可以应用于其他难溶性药物靶向递药系统的构建,同时也为其他脑部疾病治疗药物的应用提供新的思路。本文第一章首先合成了四种不同靶向功能基团修饰的壳聚糖,β-细辛醚修饰壳聚糖(βCS)、R8修饰壳聚糖(R8-CS)、PPTF修饰壳聚糖(PPTF-CS)以及R8-PPTF修饰壳聚糖(R8-PPTF-CS)。随后采用聚酯材料PEG-PLGA/PLGA与不同种类修饰壳聚糖共同制备了六种纳米粒:(1)载白藜芦醇纳米粒(RES-CS-NP)、(2)R8修饰载白藜芦醇纳米粒(RES-R8-CS-NP)、(3)R8-PPTF修饰载白藜芦醇纳米粒(RES-R8-PPTF-CS-NP)、(4)β-细辛醚修饰载白藜芦醇纳米粒(RES-βCS-NP)、(5)β-细辛醚与PPTF修饰载白藜芦醇纳米粒(RES-PPTF-βCS-NP)(6)β-细辛醚与R8-PPTF修饰载白藜芦醇纳米粒(RES-R8-PPTF-βCS-NP)。考察了制备过程中转速、水相与有机相比例和投药量对制得纳米粒的粒径和RES的载药量的影响。并根据单因素实验的结果确定最优处方。最优处方制得的六种纳米粒粒径均在150 nm左右,载药量均在1.44%左右。第二章对RES-CS-NP、RES-R8-CS-NP、RES-R8-PPTF-CS-NP、RES-βCS-NP、RES-PPTF-βCS-NP和RES-R8-PPTF-βCS-NP六种纳米粒的质量进行了评价。实验结果表明,六种不同的纳米粒子分布均一、观察外观呈规则均匀的圆球状,粒径在较小的区间内呈高斯分布,且均小于160 nm,Zeta电位显示为正电位,电位在14～24 m V之间,具有一定的电荷稳定性。HPLC法测得六种纳米粒的载药量均在1.44%左右。六种载RES壳聚糖纳米制剂在含有0.5%SDS的PBS释放介质中缓慢释放,在24 h时各组制剂释放总量均在60-70%左右,表明制剂具有一定的缓释特性。综上结果表明,所制备的纳米粒子具有良好的表面形态、物理化学性质和载药性能,并具有一定的缓释特性。第三章采用16HBE细胞作为体外鼻腔给药吸收模型,进行了Di R-CS-NP、Di R-R8-CS-NP、Di R-R8-PPTF-CS-NP、Di R-βCS-NP、Di R-PPTF-βCS-NP和Di R-R8-PPTF-βCS-NP六种纳米粒经鼻给药脑靶向性的体外初步评价。实验结果表明,Di R浓度为0.5、1.0和2.0μg/m L时,β-细辛醚和R8均能有效的促进16HBE细胞对纳米粒的摄取,摄取能力大小为:Di R-R8-PPTF-βCS-NP>Di R-PPTF-βCS-NP>Di R-βCS-NP>Di R-R8-PPTF-CS-NP>Di R-R8-CS-NP>Di R-CS-NP。证实相对于未修饰和单修饰的纳米粒,R8-PPTF和βCS共修饰纳米粒DiR-R8-PPTF-βCS-NP具有更好的经鼻入脑转运性能。第四章进行了DiR-R8-PPTF-βCS-NP纳米粒经鼻给药后脑靶向性的体内评价。活体成像脏器的荧光分布结果表明,纳米粒主要聚集在脑部。另外,相对于未修饰和βCS修饰纳米粒,R8-PPTF-βCS共修饰纳米粒具有更好的脑内递送效果。对比不同制剂组的脑部荧光结果,纳米粒大脑的分布显示出一定的趋势:Di R-R8-PPTF-βCS-NP>Di R-βCS-NP>Di R-CS-NP。综上结果表明R8-PPTF-βCS共修饰纳米粒Di R-R8-PPTF-βCS-NP将壳聚糖促进鼻腔粘膜吸收、β-细辛醚引药上行和R8-PPTF促进经鼻入脑转运作用相结合,具有更好的经鼻入脑转运和脑靶向性能。