论文部分内容阅读
七味白术散对HRV感染乳鼠肝组织保护作用目的：探讨HRV感染乳鼠肝组织病理及其功能变化,阐明中药七味白术散对感染乳鼠肝组织的保护机理。方法：1.空斑形成实验确定HRV病毒滴度,以空斑形成单位(Plaque forming unit, PFU)表示病毒的感染滴度；用HRV悬液,经口途径感染5日龄乳鼠,取乳鼠粪便经单克隆抗体酶联免疫法(McELISA)证实轮状病毒抗原阳性后,建立乳鼠感染HRV模型。2.将乳鼠按窝随机分为模型组(MG)、七味白术散组(BG)、病毒唑组(ZG),并设立正常对照组(NG),合四组。各治疗组乳鼠分别在经口滴入相应的药物50μl/(只·次),3次/天。正常对照组与模型组经口滴入等量细胞维持液。3.(1)治疗5日乳鼠断头取血,进行肝功能检测。乳鼠肝组织进行病理切片,HE染色和铅铀染色,观察肝组织病理,肝细胞超微结构变化。(2)ELISA方法测定经药物干预前后乳鼠血清中IL-2、IL-8、TNF-α、 IFN-y的含量；RT-PCR方法测定乳鼠肝组织IL-2、IL-8、TNF-α、 IFN-y mRNA的表达。结果：1.乳鼠感染HRV连续治疗5天后,BG乳鼠血清中AST、ALT含量与ZG比较差别无统计学意义(P>0.05),但明显低于MG血清中AST、 ALT含量(P<0.05)。2.普通生物光学显微镜下正常乳鼠肝组织结构清晰,无炎症细胞浸润；模型组乳鼠肝组织充血和肝细胞空泡变性,炎症细胞浸润；病毒唑治疗组乳鼠肝组织有轻度充血和肝细胞空泡变性；七味白术散组乳鼠肝组织有轻度充血,但炎症细胞极少见。电子显微镜下：正常乳鼠肝细胞形态正常,内嵴清楚,胞质中可见糖原颗粒,线粒体完整可见。模型组乳鼠肝细胞内脂质颗粒沉积,出现胆色素,肝细胞有固缩、裂解,微绒毛脱落,线粒体肿胀明显,可见空泡形成,肝毛细胆管扩张,可见胆汁淤积。病毒唑治疗组乳鼠肝细胞部分粗面内质网肿胀,线粒体空泡肿胀,肝细胞局灶性溶解,内有空泡形成。七味白术散组乳鼠肝细胞内有局灶性溶解,少量空泡变性,肝细胞内粗面内质网扩张,可见线粒体肿胀。3.乳鼠血清IL-2、IL-8、TNF-α、 IFN-y表达比较：七味白术散组IL-8、TNF-α含量明显低于模型组(P<0.05),与病毒唑组比较差别无统计学意义(P>0.05),高于正常组(P<0.05)。七味白术散组IL-2、IFN-γ含量高于模型组(P<0.05),与病毒唑组比较差别无统计学意义(P>0.05),高于正常组(P<0.05)；乳鼠肝组织中IL-8mRNA、 TNF-αmRNA IL-2mRNA、 IFN-γmRNA表达与ELISA检测结果相近。结论：通过调节细胞因子IL-2、IL-8、TNF-α、 IFN-γ表达,从而减少感染乳鼠肝组织炎症反应,降低血清中AST、 ALT含量,可能是七味白术散保护HRV感染乳鼠肝组织的重要作用机理。