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目的：通过广谱miRNA芯片技术筛查调控端粒酶活性的特异性miRNA。方法：选择端粒酶阳性细胞株人喉鳞癌细胞(Hep-2),人鼻咽癌细胞(CNE)及端粒酶阴性细胞株人骨肉瘤细胞(U-2 OS),正常组织细胞人肺上皮细胞(BEAS-2B),抽提所有细胞总RNA并进行Hy3荧光标记,在miRCURYTM LNAArray(v.11.0)(Exiqon)芯片上进行杂交反应,同时采用实时定量PCR验证miRNAs芯片结果的可靠性。结果：芯片结果显示5种miRNA：hsa-miR-301b,hsa-miR-624,hsa-miR-22,hsa-miR-618,hsa-miR-1267在端粒酶阳性细胞中高表达,7种miRNA：hsa-miR-512-5p, hsa-miR-647, hsa-miR-194, hsa-miR-135a, hsa-miR-621hsa-miR-640,hsa-miR-155在端粒酶阴性细胞中高表达。在所有这些表达差异的miRNA中,miR-512-5P在两类细胞中表达差异最大。结论：miR-512-5P可能参与了肿瘤细胞端粒酶活性的内在调控。目的：探讨miRNA-512-5P调控肿瘤端粒酶可能的机制。方法：通过miRNA数据库寻找miR-512-5p可能的靶基因,构建miR-512-5p质粒并转染肿瘤细胞,观察miR-512-5p对靶基因的抑制作用,并通过荧光素酶方法验证其作用靶点。结果：经多个miRNA数据库交叉分析后,发现miR-512-5p可能的靶基因为端粒酶逆转录酶hTERT,在端粒酶阳性细胞中转染miR-512-5p质粒后,hTERT蛋白表达量明显下降,同时荧光素酶检测发现荧光素酶活性下降明显,揭示了miR-512-5p对hTERT的直接靶向和抑制作用。结论：miR-512-5p通过直接靶向抑制hTERT蛋白的表达从而抑制端粒酶活性。目的：探讨miR-512-5p对头颈部鳞癌细胞的抑制作用。方法：将miR-512-5p质粒转染肿瘤细胞后,观察肿瘤细胞端粒酶、端粒长度的改变,细胞凋亡以及细胞增殖的的变化情况。同时建立裸鼠荷瘤模型,在体内水平验证miR-512-5p对肿瘤的抑制作用。结果：miR-512-5p能有效降低端粒酶的活性、缩短端粒长度,同时促进肿瘤细胞凋亡发生率增加,体外实验结果证实导入miR-512-5p后瘤细胞增殖明显受限。同时裸鼠移植瘤体内实验也证实了miR-512-5p可以明显减慢肿瘤的生长速度和瘤内hTERT蛋白的表达。结论：miR-512-5p在体内或者体外均能抑制头颈部肿瘤的增殖,其作用机制可能与靶向抑制hTERT蛋白的表达导致端粒酶活性下降、端粒长度缩短和细胞凋亡增加有关。