论文部分内容阅读
齐墩果酸(Oleanolic acid,OA)是一种治疗急性黄疸型肝炎和慢性肝炎的五环三萜类药物,广泛分布于青叶胆、女贞子等药用植物中。现在市售制剂有齐墩果酸片剂、胶囊,其不足在于齐墩果酸的溶解度小(4.61μg/ml),致使在胃肠道吸收不全,生物利用度低,服用剂量大、次数多,因而限制了其临床应用。缓释滴丸是基于缓控释固体分散体技术并采用滴制法制成滴丸的形式,具有增加药物溶解度和控制药物释放的特点。因此,本文利用缓释固体分散体技术,以硬脂酸为缓释材料,PEG6000、F68为速释材料,用熔融法将OA制备成缓释滴丸,并对其处方工艺、稳定性和药代动力学进行了研究。拟解决OA在临床应用中存在的不足,以期在提高OA生物利用度的同时,实现缓控释的目的,以降低服用剂量和次数,提高患者的顺应性,扩大其在临床上的应用。本文完成的主要工作和结论如下:1.建立了OA纯度≥98.5%的重结晶方法。OA为中药提取物,其含量为96.36%,本文通过重结晶法纯化后含量达到99.25%,达到了《化学药品管理办法》要求的≥98.5%。因此,该药品可作为化学药品进行制剂开发研究。2.建立了紫外光谱法直接测定OA缓释滴丸及释放度中药物的含量。该法准确、可靠,与高效液相色谱法相比,更简便、快捷、且节省耗材、减少污染。在207nm波长下,含量测定时,OA在20～80μg/ml范围内,线性关系良好r =0.9995(n=7),回收率在98%～102%之间,RSD<1%;释放度测定时,OA在10～70μg/ml范围内,线性关系良好r =0.9997(n=7),回收率在98%～102%之间,RSD≤1%。3.筛选并确定了OA缓释滴丸的最佳处方。选择基质的配比、药物含量、冷凝剂温度、滴距为4个因素,每个因素设置3个水平,运用L9 (34)正交设计试验,以滴丸圆整度、丸重差异、载药率、释放度为指标,进行处方优化考察,其最佳处方为:药物含量为5%、基质配比为PEG6000:F68:硬脂酸=50%:30%:20%、冷凝剂温度为15±5℃、滴距为3cm;所制缓释滴丸圆整度好(0.98±0.01),丸重差异小(RSD≤1%),缓释滴丸体外可持续释药12h,累积释放度达90%以上,释放行为符合Higuchi模型,重复性好(n=3);DSC分析表明药物结晶峰消失,药物以无定形或分子状态存在。4.考察了OA缓释滴丸的稳定性。经影响因素试验显示,高温(60℃),高湿(25℃,RH90%士5%)对OA缓释滴丸影响很大;在高温(40℃),光照(4500LX士500LX)条件下稳定性良好;高湿(25℃,RH75%士5%)使OA缓释滴丸含量降低,释放速率加快,丸重增加。加速实验表明,缓释滴丸在40℃士2℃, RH75%士5%条件下放置3个月后质量稳定。5.建立了衍生化-比色法测定家兔血浆中OA的含量。该法简单、快捷。血浆中杂质不干扰样品的测定,在5μg/ml-70μg/ml范围内线性关系良好(R=0.9971),相对回收率在80%-120%之间,萃取回收率在70%-80%之间,精密度RSD均小于5.0%,OA在室温条件下,冻融条件下,长期条件下,血浆样品稳定性均良好。符合生物样本的分析要求。6.考察了OA缓释滴丸的体内药代动力学。以OA片剂为参照制剂,采用自身对照交叉给药法,对6只家兔进行体内药代动力学实验,结果表明,OA缓释滴丸和OA片剂相比,Cmax由41.3 mg/L降低到33.7mg/L, Tmax由1.5h延长到2.0 h。OA缓释滴丸相对OA片剂生物利用度为149.8%,血药浓度曲线呈缓慢下降趋势。