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目的:通过检测患者血液和组织中P-选择素、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平,探讨它们在下肢静脉性皮肤溃疡形成过程中所起的作用,并对其进行相关性分析,从而为治疗下肢静脉性皮肤溃疡新疗法在临床上的开展和运用提供实验依据。方法:(1)选取昆明医学院第四附属医院2009年4月到2011年1月单侧下肢静脉性皮肤溃疡收治入院12例12条下肢,男性7例,女性5例。收集患者一般资料,入院后予以患者行双下肢血管多普勒检查,比较患肢与健康下肢的动脉通畅情况、浅静脉及深静脉通畅情况、瓣膜功能情况及血液返流情况。行患肢经皮选择性逆行静脉造影,观察溃疡基底部交通静脉情况、浅静脉迂曲扩张程度和明确手术部位。(2)手术前及手术后120d在同一部位抽取患肢足背静脉血液5m1后置于-80℃冰箱中冻存;手术中取溃疡周边1-2cm处的组织作为溃疡组,取距溃疡组织20cm处的小腿正常组织作为对照组,组织标本用固定液固定,并置于常温冰箱中保存。(3)从血液标本、溃疡组织和正常组织中提取RNA,用定量RT-PCR方法检测HIF-1α、P-选择素和TNF-α的表达水平。拟证明这三种因子在静脉性皮肤溃疡的形成中表达增强,手术后血液中处于低表达。结果:(1)患者双下肢血管多普勒检测:患肢与健康肢动脉血流音正常,12例患者中所有的患肢大隐静脉全程返流,小隐静脉有返流;8例患者的股深静脉、股浅静脉和胭静脉瓣膜功能良好,无返流;3例患者深静脉返流,但无血栓形成,血流通畅;1例患者有不同程度深静脉血栓形成或再通。在12例患者的健康肢中9例患者的浅静脉和深静脉均无异常,3例患者有不同程度的浅静脉曲张。(2)经皮选择性顺行深静脉造影观察11例患者的溃疡基底部出现交通静脉瓣膜功能障碍,浅静脉迂曲扩张严重,多集中在小腿段及足靴部位,其中3例患者深静脉有返流。(3)HIF-1α、P-选择素和TNF-α在下肢静脉性皮肤溃疡患者的血液及溃疡组织中表达情况及与溃疡形成的关系:在12例患有下肢静脉性皮肤溃疡的患者血液中,溃疡组织中及正常组织中表达情况,从方差分析结果表明3个指标(TNF-α、P-选择素和HIF-1α)组间差别均有统计学意义(P<0.01);多重比较结果显示对照组与术前血液组、溃疡组与术前血液组及溃疡组和对照组之间分别有统计学差异(P<0.05),术前血液组最高,溃疡组其次,对照组最低。说明这三种因子在下肢静脉性皮肤溃疡患者的血液及溃疡组织中表达情况及与溃疡形成有关。(4) HIF-1α、P-选择素和TNF-α在下肢静脉性皮肤溃疡形成过程中相互关系:通过RT-PCR实验结果看出,三指标彼此之间相关,有统计学意义(P<0.05);均成正的弱相关性,其中TNF-α和P-选择素相关系数最大,r=0.60。无论术前血液组,溃疡组还是正常组织中,其均数是:HIF-1α>P-选择素>TNF-α。进一步推测溃疡的形成与这些因子的表达可能有一定的关系,并且这些因子都是来自血液中。(5)经皮透光负压旋切术后血液组中HIF-1α、P-选择素和TNF-α表达水平较术前血液组降低(P<0.05),促进了溃疡的愈合。结论:(1) HIF-1α、P选择素和TNF-α在下肢静脉性皮肤溃疡患者的术前血液组和溃疡组中表达增强,说明与溃疡生成有一定的关系。(2) HIF-1α、P-选择素和TNF-α在术前血液组和溃疡组中表达水平均增高,但P-选择素和HIF-1α的表达水平要比TNF-α的高,说明在静脉性皮肤溃疡生成中HIF-1α和P-选择素较TNF-α的作用强。(3)经皮透光负压旋切术治疗下肢静脉性皮肤溃疡,降低了HIF-1α、P-选择素和TNF-α的表达水平,加快溃疡的愈合,减轻皮肤感染和减少溃疡的复发。